[发明专利]SPACA7基因的用途

说明书

本发明公开了一种SPACA7基因的用途，其用于制备检测非梗阻无精子症的产品。该产品包括一对特异性扩增SPACA7基因的引物，其上游引物的序列如SEQ ID NO：1所示，其下游引物的序列如SEQ ID NO：2所示。通过SPACA7基因，为非梗阻性无精子症的检测提供了一种新的检测指标。仅需一对引物通过RT‑PCR检测即可实现正常生育者和无精子症患者的区分检测，整个操作过程更加简易，耗时短，利于临床检验。

技术领域

本发明属于基因工程技术和生殖医学领域，尤其是关于一种非梗阻无精子症检测试剂盒。

背景技术

根据世界卫生组织的统计资料，不孕不育症占育龄夫妇的20％左右，其中男性因素导致不孕不育约占50％。男性不育症给个人、家庭和社会带来了沉重的负担，世界卫生组织宣布，不育症与心血管病、肿瘤并列为当今影响人类生活和健康的三大主要疾病之一。随着社会工业化程度的提高和生活节奏的加快，加上环境污染和不良生活习惯等因素，男性精液质量日趋下降，无精子症、少精子症和弱精子症等男性不育患者人数逐年上升，男性生殖健康的问题越来越受到全社会的关注。

目前男性不育症的诊断主要基于标准精液分析，包括精液参数分析，如精子的浓度、精子的运动性和精子形态、活力等，但在很多情况下，常规精液分析对于预测精子生育力十分有限。仅通过常规精液参数分析不足以区分可育受试者和不育受试者，例如，具有正常精子计数不与生育力同义，减少的计数不代表不育。常规精液参数分析在许多情况下不能检测到任何异常，这在不孕或反复辅助生殖失败与正常常规精液参数的情况下尤其明显。因此假设在这些情况下存在异常精子功能或分子缺陷，必须考虑其它精子特征，并触发旨在鉴定新的潜在生物分子标志物的进一步研究。特别地，重要的是考虑精子DNA改变，例如DNA完整性、染色质包装缺陷、细胞凋亡、氧化应激、DNA断裂和非整倍性等。精子DNA的完整性对于精子功能和胚胎发育至关重要，损伤的DNA可能对胎儿发育、后代健康、胚泡发育、受精卵着床和流产等有重要影响。精子DNA完整性被认为是男性不育症诊断中越来越重要的参数。

精子顶体相关蛋白7(SPACA7)属于精子顶体结合蛋白家族成员，在人类、小鼠、黑猩猩、猕猴中有同源物，但是这些蛋白没有保守的结构域，并且其功能尚不明确。人SPACA7基因定位于染色体13q34位点，其cDNA长度773bp，在32-619bp之间有一阅读框，含有588bp的完整开放阅读框，编码一个由195个氨基酸组成、分子量为21.48KDa的蛋白质，等电点4.65,32-34处为起始密码子ATG，617-619处为终止密码子TGA，SPACA7蛋白在1-19位氨基酸处有跨膜区。该蛋白主要在成熟的精子中表达，在支持细胞、精原细胞中不表达。

深圳市第二人民医院申请了公开号为CN105176976A、名称为“一种检测与非梗阻性无精子症相关的遗传标记的引物对”和公开号为CN106170562A、名称为“一种检测与特发性无精子症相关的遗传标记的试剂盒”以及公开号为CN104531683A、名称为“一种与非梗阻性无精子症相关的遗传标记”等发明专利申请，其特点是采用高通量测序的方法筛选到无精子症患者中基因的突变位点，利用不同的引物对来检测，但其缺点是所需引物对较多，PCR操作繁琐。

发明内容

本发明提供一种新的非梗阻无精子症检测试剂盒。

本发明提供一种SPACA7基因的用途，其用于制备检测非梗阻无精子症的产品。

所述检测非梗阻无精子症的产品是用RT-PCR检测非梗阻无精子症的产品。该产品也可以是能够检测非梗阻无精子症的基因芯片。

所述用RT-PCR检测非梗阻无精子症的产品包括一对特异性扩增SPACA7基因的引物，其上游引物的序列如SEQ ID NO：1所示，其下游引物的序列如SEQ ID NO：2所示。

一种非梗阻无精子症检测试剂盒，其能够特异性识别SPACA7基因。