[发明专利]硅烷氨基化修饰的上转换荧光纳米材料及制备方法、Lp-PLA2检测试剂及制备方法

说明书

本发明涉及Lp‑PLA2的检测技术领域，具体涉及硅烷氨基化修饰的上转换荧光纳米材料及制备方法、Lp‑PLA2检测试剂及制备方法。本发明的硅烷氨基化修饰的上转换荧光纳米材料的制备方法，包括以下步骤：将NaY_xF₄:Yb_y/Tm_z@NaY_xF₄:Yb_y/Tm_z的氯仿分散液与十六烷基三甲基溴化铵溶液混合，之后离心分离得复合沉淀，将所述复合沉淀与乙醇、水在pH为8～9条件下反应20～40min，然后升温至60～80℃，加入正硅酸四乙酯反应1～3h，之后与氨丙基三乙氧基硅烷继续反应1～3h即得。该材料可标记Lp‑PLA2抗体用以定性检测脂蛋白磷脂酶A2。

技术领域

本发明涉及Lp-PLA2的检测技术领域，具体涉及硅烷氨基化修饰的上转换荧光纳米材料及制备方法、Lp-PLA2检测试剂及制备方法。

背景技术

大部分心脑血管患者存在一个或多个危险因子，传统危险因子并不能解释所有的冠状动脉事件，这促使人们去寻找新的致病因子。炎症已经被公认是动脉粥样硬化炎症标记物(AS)发生发展过程中的核心因素，多种炎症因子参与其中导致斑块的形成、进展和最终破裂。CRP和脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)是近年来引起广泛关注与AS密切相关的新炎症标记物，而Lp-PLA2的检测能直接准确的反映血管内炎症的程度，并且可作为一个动态指标。Lp-PLA2是血管特异性的炎症因子，又称血小板活化因子乙酰水解酶(PAF-AH)，分子量为45400，由成熟的巨噬细胞和淋巴细胞合成和分泌，并受炎性介质的调节，70％与低密度脂蛋白(LDL)结合，能水解低密度脂蛋白上的氧化卵磷脂，生成促炎物质—溶血卵磷脂(LPC)、氧化游离脂肪酸(ox-NEFA)，因此具有很强的促炎症和促动脉粥样硬化的作用。Lp-PLA2是独立的心脑血管疾病风险预测指标，不受其他生物指标的影响，也为炎症、动脉粥样硬化与心脑血管疾病之间的联系提供了新的佐证。

荧光标记在生物制药和临床诊断领域占据重要地位，好的标记抗体可起到犹如导弹的作用，使药物达到靶向治疗的特异效果；能使临床诊断检验中得出准确、可靠的结果。对抗体进行荧光标记是抗体修饰中的一项高难技术，它不但需要合理成熟的操作流程，更需要质量优异的化学标记材料。基于稀土掺杂的荧光纳米材料，主要包括上转换荧光纳米材料和长余辉荧光纳米材料，上转换发光是一种非线性过程，是指材料吸收两个或多个低能量的光子而发出高能量光子的过程。长余辉发光是指材料在激发停止后，发光仍能持续一段时间。两种材料虽然发光过程和发光机制不同，但因其均具有信噪比高、反斯托克位移大、荧光性能稳定以及穿透深度大等优势被广泛用作生物标记材料，同时以近红外光作为激发光源或者成像信号，可以极大地降低生物组织的背景干扰，如自体荧光等，从而显著提高检测的灵敏度。因此，利用稀土掺杂的荧光纳米材料标记Lp-PLA2单克隆抗体可快速有效的检测出目标抗原，具有特异性，高灵敏度等优点。

发明内容

本发明的目的在于提供一种硅烷氨基化修饰的上转换荧光纳米材料的制备方法，该方法得到的材料可标记Lp-PLA2抗体用以定性检测脂蛋白磷脂酶A2。

本发明的第二个目的在于提供一种硅烷氨基化修饰的上转换荧光纳米材料。

本发明的第三个目的在于提供一种基于硅烷氨基化修饰的上转换荧光纳米材料的Lp-PLA2检测试剂。

本发明的第四个目的在于提供一种上述检测试剂的制备方法。

为实现以上目的，本发明的技术方案是：