[发明专利]一种利用水溶性光吸收剂提升图像信噪比的方法

说明书

本发明公开一种利用水溶性光吸收剂提升图像信噪比的方法，包括：将生物组织进行预处理，并配制水溶性光吸收剂‑PBS混合溶液；将所述预处理后的组织在所述水溶性光吸收剂‑PBS溶液中进行渗透处理；将渗透后的组织在成像系统上成像。本发明提供一种基于水溶性光吸收剂抑制组织背景荧光，提升图像信噪比的方法，此方法使用过程中不需要对生物组织进行脱水处理，操作简洁，不会引起组织形变，且普适性好。

技术领域

本发明涉及一种生物光学成像技术领域，尤其涉及一种利用水溶性光吸收剂提升图像信噪比的方法。

背景技术

生物光学成像(Optical Imaging)是指利用光学的探测手段结合光学探测分子对细胞或者组织甚至生物体进行成像，来获得其中的生物学信息的方法。如果把生物光学成像限定在可见光和近红外光范围，依据探测方式的不同生物光学成像可分为荧光成像、生物发光成像、光声成像、光学断层层析成像等。

生物光学成像可用来获取生物组织如脑、心脏、肝脏、肾脏、胰腺等结构信息。比如在神经科学领域，获取不同类型神经元的精细形态及其所处的准确位置，明确神经元类型，从而判断其结构异常以及与其密切相关的神经类疾病的发生。更进一步的，不仅要获取完整的神经元胞体、轴突、树突等整体结构信息，还希望获取到树突脊、突触小结及轴突末梢等精细结构信息。

传统的生物光学成像技术通常会受到样本背景荧光的干扰，以至于难以获取到高信噪比的图像。目前解决上述的背景荧光干扰问题主要分为样本深层的焦外信号和组织的自发荧光。针对厚组织块进行成像时，目前我们用到的抑制组织背景荧光提升图像信噪比的方法主要涉及以下两个方面：

(1)从成像方式上考虑有激光扫描共聚焦或结构照明抑制背景技术、TDI系统中的多重积分方法等，但是图像信噪比依然受限于样本本身背景荧光强弱，且成像速度慢。

(2)从样本自身考虑有将一定浓度的SBB溶解在酒精中，渗透生物组织，通过SBB结合生物组织中的脂褐质降低组织自身的自发荧光同时吸收深层信号的荧光来抑制背景荧光的方法。由于SBB为脂溶性染料，需溶解在酒精中，所以其渗透生物组织后会使组织产生一定程度的形变，不利于形态的保持。

综上所述，当前的抑制组织背景荧光提升图像信噪比的方法存在成像速度慢、背景荧光抑制不彻底或是组织形态保持不佳的问题。

发明内容

有鉴于此，我们提出了一种基于水溶性光吸收剂Keyamine^TMBlack SP-IJ Liquid抑制组织背景荧光，提升图像信噪比的方法。此方法使用过程中不需要对生物组织进行脱水处理，操作简洁，不会引起组织形变，且普适性好。

为解决以上技术问题，本发明的技术方案为采用一种利用水溶性光吸收剂提升图像信噪比的方法，包括：

预处理步骤，将组织进行预处理，并配制水溶性光吸收剂-PBS溶液；

渗透处理步骤，将所述预处理后的组织在所述水溶性光吸收剂-PBS溶液中进行渗透处理；

成像步骤，将渗透后的组织在成像系统上成像。

优选的，所述将组织进行预处理具体为：

提供活体组织；

将所述组织进行PFA后固定，PBS漂洗。

优选的，所述提供水溶性光吸收剂-PBS溶液具体为：

将水溶性光吸收剂与PBS溶液混合得到水溶性光吸收剂的质量浓度为0.1％-5％的水溶性光吸收剂-PBS溶液。

优选的，所述水溶性光吸收剂选自如下化合物中的一种或多种：Keyacid^TMBlackWA BR Conc、Keyamine^TMBlack SP-IJ Liquid、食用黑或C.I.直接黑19。