[发明专利]用于同步检测4种猪传染病病毒的引物组合及检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种用于同步检测4种猪传染病病毒的引物组合及检测试剂盒。具体采用四对引物，一次RT‑PCR同步快速检测与甄别猪的重要烈性传染病病原体，包括猪瘟病毒(Classical swine fever virus，CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)中的一种或任意几种。具有特异性好、灵敏度高、耗时短、同步检测与甄别等优点，适用于猪场疫情监控和猪病快速诊断。

技术领域

本发明属于猪传染病病毒的检测，具体涉及一种用于同步检测4种猪传染病病毒的引物组合及含有所述引物组合的检测试剂盒。

背景技术

猪瘟病毒(CSFV)、猪呼吸与繁殖综合征病毒(PRRSV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)分别是引起猪瘟、蓝耳病、传染性腹泻及胃肠炎等猪重要传染病的病原体，对养猪业造成严重危害；猪病发生和流行趋势通常是两种或多种病原混合感染，协同致病，临床症状不典型，危害更加严重，诊断和防控极为困难。及时准确诊断传染病病原是有效防控猪病、促进养猪业健康发展的重要前提。

猪瘟(CSF)，又称猪霍乱(hog cholera，HC)，是由CSFV感染引起的猪高度接触性致死性传染病，被世界动物卫生组织(OIE)列为A类传染病。猪瘟首次于1810年在美国田纳西(Tennessee)州爆发，随后在全球传播，因传播能力强、发病率和死亡率高，给养殖业造成巨大经济损失。系统进化分析显示，CSFV分为强毒力株、中等毒力株和低/无毒力株(疫苗株)等三种基因型。CSFV自然感染通常经鼻腔、口腔、结膜或生殖器粘膜进入猪体。CSFV感染猪体的潜伏期一般为7-10天，在感染4天左右，感染猪出现结膜炎和白细胞减少等；当CSFV强毒力株急性感染猪时，病毒先侵入扁桃体上皮细胞，经由局部淋巴结与毛细血管进入到血液，引起病毒血症。在脾脏、淋巴组织、内脏淋巴结和骨骼等器官组织中病毒大量增殖，最终导致感染猪死亡。

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是引起猪蓝耳病的病原体，因传播性强、致死率高，是严重危害全球养猪业的重要病原体之一。蓝耳病首先于1987年在美国南部发现；据报道，美国每年因PRRSV传播给养猪业造成的损失超过5亿美元。我国在1995年底首次暴发PRRSV疫情，随后在全国传播蔓延，造成巨大经济损失。在2006年，我国出现第二次PRRSV暴发流行，引起此次大流行的是高致病性PRRSV变异株，对养猪业造成了空前的危害。PRRSV主要通过呼吸道水平传播与生殖道垂直传播径。造成PRRSV流行的重要原因之一在于愈后猪、隐性感染猪与易感猪群相互接触引起的交叉感染。愈后猪和隐性感染猪通过口、鼻、眼、阴道等多种途径将病毒传播给易感猪群。蚊子也是PRRSV的传播媒介。蚊子叮咬带毒猪后再叮咬易感猪群，可使易感猪群感染。PRRSV分为Ⅰ型和Ⅱ型两种基因型。引起爆发流行主要是PRRSVⅡ型；PRRSV基因组常发生变异，导致毒力增强和抗原性改变。现行使用的疫苗对不同地区的PRRSV流行毒株保护效力存在差异，PRRSV感染后潜伏期长，愈合可能带毒和存在阴性感染，容易传播流行，早期准确的病毒学诊断对于有效预防和控制PRRSV传播流行尤为关键。