[发明专利]一种检测奥沙利铂对于肝癌化疗敏感性的试剂盒及其应用

说明书

本发明涉及一种检测奥沙利铂对于肝癌化疗敏感性的试剂盒及其应用。本发明首次发现YAP及Cyr61基因的拷贝数变化与肝癌细胞对奥沙利铂的化疗敏感性密切相关，因此，本发明采用YAP和Cyr61基因作为奥沙利铂肝癌化疗敏感性的生物标记物，制备一种化疗敏感性评估试剂盒，可方便临床评价待检肝癌患者对奥沙利铂化疗是否敏感，指导临床个体化用药，改善患者预后，且本发明的试剂盒引物特异性高，显著优于其他引物，能提供准确可靠的检测结果。

技术领域

本发明涉及医药和临床诊断技术领域，具体地说，是一种检测奥沙利铂对于肝癌化疗敏感性的试剂盒及其应用。

背景技术

肝细胞肝癌(HCC)是世界范围内常见的恶性肿瘤之一，早期诊断率低，大多数患者确诊时已处于中晚期或发生远处转移，预后不良，严重危害人类的健康。

中晚期肝癌患者大多不适合进行手术切除、消融等治疗，全身治疗仍是其重要的治疗手段，但目前的索拉非尼靶向治疗对生存期(OS)的改善有限。多中心临床研究(EACH试验)表明，以奥沙利铂为主的FOLFOX4方案化疗对国人肝细胞肝癌疗效较好，安全性较高，因此也被国家食品药品监督管理局(CFDA)批准用于治疗晚期肝细胞癌。然而，临床上固有耐药及获得性耐药制约着奥沙利铂的临床疗效，因此，为尽早克服和逆转肝癌奥沙利铂耐受，目前急需使用准确、特异、灵敏性强的分子标志物来预测奥沙利铂肝癌化疗敏感性，区分奥沙利铂肝癌化疗的敏感人群与非敏感人群，制定个体化治疗方案，从而提高临床疗效，改善患者预后。

南开大学2011年硕士论文《YAP增强人肝癌化疗药物敏感性的分子机理研究》，主要以肝癌细胞系为基础，初步探索YAP在肝癌中的分子机制。首先，作者用70例肝癌标本和10例正常肝组织染色，初步明确YAP和p-YAP在肝细胞癌中的表达情况。其次，作者验证在体外实验用的肝癌细胞系中YAP的表达情况。在此基础上，研究肝癌细胞系中表达的YAP蛋白对耐药是促进作用还是抑制作用，在明确YAP具备作用的基础上，通过大量查阅文献，并依靠以往的工作基础，尝试和探索，来进一步明确YAP对耐药影响的分子机理。具体探讨了在肝癌细胞系HepG2中，YAP对化疗药物作用的影响及下游机制，并初步得出以下结论：在化疗药物刺激下，YAP能增强HepG2的化疗敏感性；在化疗药物刺激下，YAP能增强p53的表达；YAP通过上调p53来增强化疗敏感性。

然而，目前关于YAP及Cyr61基因的拷贝数变化与肝癌细胞对奥沙利铂的化疗敏感性的关系还未见报道。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种检测奥沙利铂对于肝癌化疗敏感性的试剂盒及其应用。

第一方面，本发明提供了YAP基因或蛋白在作为奥沙利铂肝癌化疗敏感性的生物标记物中的应用。

作为一个实例，所述的肝癌为Bel-7404或SMMC-7721肝癌。

作为一个实例，所述的肝癌为Bel-7404或SMMC-7721肝癌细胞系。

第二方面，本发明提供了检测YAP基因或蛋白含量的试剂在制备检测奥沙利铂对于肝癌化疗敏感性的试剂盒中的应用。

优选地，所述的试剂包含序列如SEQ ID NO:19和SEQ ID NO:20所示的用于扩增YAP基因的引物对。

更优选地，所述的试剂进一步包含序列如SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10所示的用于扩增GAPDH基因的引物对。

更优选地，所述的试剂进一步包含序列如SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:22所示的用于扩增Cyr61基因的引物对。

第三方面，本发明提供了Cyr61基因或蛋白在作为奥沙利铂肝癌化疗敏感性的生物标记物中的应用。

作为一个实例，所述的肝癌为Bel-7404或SMMC-7721肝癌。