[发明专利]利用甜叶菊新品种814011谱星3号制备高RM含量甜菊糖苷的方法

权利要求书

1.高RM含量甜菊糖苷产品的制备方法，包括：

（a）预处理：将粉碎的 814011谱星3号甜叶菊干叶于水中萃取，制成甜菊糖苷萃取液，萃取液经过絮凝沉淀和板框压滤两道工序后，进入下一道工序；

（b）一次吸附及解吸：采用树脂吸附上述萃取液中甜菊糖苷有效成分，到树脂出甜时止；用氢氧化钠稀溶液、盐酸稀溶液、纯水洗树脂，至流出液pH值达到7时止；用乙醇溶液对树脂进行分柱解吸，得含糖苷量为78~86%的解吸液，解吸液进入下一道工序；

（c）一次离子交换：解吸液依次通过一次离子交换除杂后，蒸发浓缩，得到含苷量在82~88%的浓缩液，浓缩液进入下一道工序；

（d）二次离子交换：将浓缩液再通过二次离子交换树脂进行深度除杂，浓缩得到含苷量≥80%的浓缩液，再除菌过滤，浓缩液进入下一道工序；

（e）喷雾干燥：将除菌过滤后的浓缩液喷雾干燥，得到RM/TSG大于0.08，RD/TSG大于0.08，TSG≥80%的甜菊糖苷产品，

其中，步骤（a）中，所述甜叶菊干叶通过甜叶菊变种植物814011谱星3号的愈伤组织再生而获得，所述甜叶菊变种植物814011谱星3号的愈伤组织由中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心（CGMCC）保藏，保藏号为CGMCC No.9701。

2.高RM含量甜菊糖苷产品的制备方法，包括：

（a）预处理：将粉碎的814011谱星3号甜叶菊干叶于水中萃取，制成甜菊糖苷萃取液，萃取液经过絮凝沉淀和板框压滤两道工序后，进入下一道工序；

（b）一次吸附及解吸：采用树脂吸附上述萃取液中甜菊糖苷有效成分，到树脂出甜时止；用氢氧化钠稀溶液、盐酸稀溶液、纯水洗树脂，至流出液pH值达到7时止；用乙醇溶液对树脂进行分柱解吸，得含糖苷量为78~86%的解吸液，解吸液进入下一道工序；

（c）一次离子交换：解吸液依次通过一次离子交换除杂后，蒸发浓缩，得到含苷量在82~88%的浓缩液，浓缩液进入下一道工序；

（d）二次吸附提纯：用二次吸附树脂三柱串联吸附上述浓缩液除杂，得到含苷量≥95%的甜菊糖苷提纯液，提纯液进入下一道工序；

（e）二次离子交换：将提纯液通过二次离子交换树脂进行深度除杂，浓缩得到含苷量≥95%的浓缩液，再经过除菌滤膜除菌过滤，浓缩液进入下一道工序；

（f）喷雾干燥：将除菌过滤后的浓缩液喷雾干燥，得到RM/TSG大于0.08，RD/TSG 大于0.08，TSG≥95%的甜菊糖苷产品，

其中，步骤（a）中，所述甜叶菊干叶通过甜叶菊变种植物814011谱星3号的愈伤组织再生而获得，所述甜叶菊变种植物814011谱星3号的愈伤组织由中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心（CGMCC）保藏，保藏号为CGMCC No.9701。

3.高RM含量甜菊糖苷产品的制备方法，包括：

（a）预处理：将甜叶菊叶子与50℃软水按重量比1:15混合，制成甜菊糖苷提取液，经过絮凝沉淀和板框压滤两道工序，板框过滤后的滤液进入下一道工序；

（b）一次吸附及解吸：用一次吸附树脂吸附上述滤液中甜菊糖苷有效成分，用氢氧化钠溶液、盐酸溶液处理吸附了甜菊糖苷有效成分的树脂，纯水淋洗树脂，至流出液pH值达7时止，再用乙醇溶液进行解吸，得到含苷量84.5%的解吸液，解吸液去醇进入下一道工序；

（c）一次离子交换：去醇解吸液依次通过一次离子交换除杂，蒸发浓缩得到含苷量为85.3%的一次浓缩液，浓缩液进入下一道工序；

（d）二次离子交换：将浓缩液通过二次离子交换树脂进行深度除杂，经过浓缩得到含苷量为85.4%的二次离子交换液，再进行除菌滤芯除菌过滤，无菌液进入下一道工序；

（e）喷雾干燥：将无菌液进行喷雾干燥，得到RM/TSG大于0.08，RD/TSG大于0.08的甜菊糖苷产品，含苷量为85.4%，

其中，步骤（a）中，所述甜叶菊叶子通过甜叶菊变种植物814011谱星3号的愈伤组织再生而获得，所述甜叶菊变种植物814011谱星3号的愈伤组织由中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心（CGMCC）保藏，保藏号为CGMCC No.9701。

4.高RM含量甜菊糖苷产品的制备方法，包括：

（a）预处理：将甜叶菊叶子与 70℃软水按重量比1:20混合，制成甜菊糖苷提取液，经过絮凝沉淀和板框压滤两道工序，板框过滤后的滤液进入下一道工序；

（b）一次吸附及解吸：用一次吸附树脂吸附上述滤液中甜菊糖苷有效成分，用氢氧化钠溶液、盐酸溶液处理吸附了甜菊糖苷有效成分的树脂，再用乙醇溶液进行解吸，得到含苷量82.6%的解吸液，解吸液去醇进入下一道工序；

（c）一次离子交换：去醇解吸液依次通过一次离子交换除杂，蒸发浓缩得到含苷量为85.7%的一次浓缩液，浓缩液进入下一道工序；

（d）二次吸附提纯：用二次大孔吸附树脂三柱串联吸附上述浓缩液除杂，得到含苷量为96.5%甜菊糖苷提纯液，提纯液进入下一道工序；

（e）二次离子交换：通过二次离子交换树脂进行深度除杂，经过浓缩得到含苷量为96.9%的二次离子交换液，再进行除菌滤芯除菌过滤，无菌液进入下一道工序；

（f）喷雾干燥：将无菌液进行喷雾干燥，得到甜菊糖苷产品，产品 RM/TSG大于0.08，RD/TSG大于0.08，含苷量为97.07%，

其中，步骤（a）中，所述甜叶菊叶子通过甜叶菊变种植物814011谱星3号的愈伤组织再生而获得，所述甜叶菊变种植物814011谱星3号的愈伤组织由中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心（CGMCC）保藏，保藏号为CGMCC No.9701。