[发明专利]一种黄酮-皂苷混源萜类化合物及其制备方法

说明书

本发明公开了风轮菜中的两种新成分及其提取分离方法。该发明具体公开了从风轮菜干燥地上部分提取，萃取，柱层析分离以及HPLC纯化得到两种结构新颖的黄酮皂苷混源萜类化合物的制备方法，并利用现代波谱技术鉴定分离得到的两个化合物，确定这两个化合物的化学结构，分别命名为clinoposides G和clinoposides H。该两个化合物结构特征为结构新颖的黄酮皂苷混源萜类化合物。

技术领域

本发明涉及对植物中提取分离纯化从而得到具有生物活性的化合物。具体是对唇形科植物风轮菜Clinopodium chinense(Benth.)O.Kuntze的地上部分提取分离纯化得到的2个新化合物。

背景技术

心血管疾病已成为全世界第一位致死致残原因，心血管疾病具有发病率高、致残率高、死亡率高、复发率高、并发症多的特点。发病形式多样，给人类社会带来了极大的痛苦和死亡威胁。近年来，国内外许多专家学者都在致力于发现预防和治疗心血管疾病的有效方法，而寻找高效低毒的防治心血管疾病的天然药物是科学工作者研究的热点课题之一。

风轮菜(Clinopodium chinense(Benth.)O.Kuntze)为唇形科风轮菜属植物，味微苦涩，性凉，归肝经，具有收敛止血的功效，常用于治疗各种出血症。现代研究表明，风轮菜主要含有黄酮、三萜皂苷、萜类、挥发油、甾体等，风轮菜提取物既有治疗糖尿病、冠心病以及心肌缺氧保护等作用。本课题组一直致力于从天然产物中寻找具有良好疗效的治疗和/或预防心血管疾病的药物。我们前期研究发现，风轮菜具有止血和活血的双向调节作用，在止血的同时又可以祛除已瘀之血，从而达到止血而不留淤的效果，治疗和/或预防心血管疾病方面具有独特的优势，有着良好的研究开发前景。

由于风轮菜中含有众多化合物，其所含有的活性化合物的结构还不明确，目前还不知道是哪一种物质为活性物质，是其难以进行进一步的应用，因此，确定风轮菜中具体活性物质的结构和药理活性具有重要的意义。

发明内容

为解决上述问题，本发明人进行了大量研究，从风轮菜正丁醇部位中得到2个黄酮皂苷混源萜类成分，均为新化合物。这2个新型混源萜类化合物分别命名为clinoposides G和clinoposides H。

本发明的另一个目的是提供clinoposides G和clinoposides H在心肌细胞缺氧复氧损伤中的保护作用。

一种黄酮-皂苷混源萜类化合物，名称为clinoposides G(1)或 clinoposides H(2)，结构如下式所示：

本发明还提供了一种所述的黄酮-皂苷混源萜类化合物的制备方法，包括以下步骤：

(1)将风轮菜地上部分粉碎后，用乙醇回流提取，减压回收乙醇，得到浸膏；

(2)用水溶解此浸膏后，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇提取，对正丁醇提取液减压回收溶剂，得到正丁醇萃取物；

(3)将正丁醇萃取物以D101大孔吸附树脂处理，依次以水-乙醇洗脱剂进行梯度洗脱，合并50-85％乙醇洗脱物，得到总皂苷；

(4)将总皂苷部位经硅胶柱层析以氯仿：甲醇进行梯度洗脱，用薄层色谱进行检识合并相似组分得到FZ(A-H)8个部分，FZ-G经C18反相柱层析，以甲醇：水梯度洗脱，得到23个流分，经薄层示踪并合并相同组分，得到FZ-G(Fr.1-9)9个部分；

(5)将FZ-G(Fr.6)进行Sephadex LH-20羟丙基葡聚糖凝胶柱层析，以甲醇为洗脱剂进行洗脱，得到4个流分FZ-G(Fr.6.1-6.4)，将其中的 FZ-G(Fr.6.4)经过制备液相分离纯化得到化合物2clinoposides H，保留时间为29min；