[发明专利]一种丁酸梭菌的新型发酵方法

说明书

本发明公开了一种丁酸梭菌的新型发酵方法，包括以下步骤：S1、接种发酵：将丁酸梭菌种子液按照体积分数为5‑10％的数量比接种至丁酸梭菌发酵培养基，在温度为35‑40℃下培养10‑20小时，S2、补料发酵：在所述的步骤S1制备的丁酸梭菌发酵液中流加混合碳源，补料发酵12‑24小时，在发酵开始后的12小时、16小时、20小时和24小时等量流加，S3、补碱控制：经过步骤S2补料发酵后的丁酸梭菌发酵液在50‑100r/min的搅拌速度下加入20％的碳酸钠控制丁酸梭菌发酵液pH为6.5；S4、孢子化发酵：在所述的步骤S3补碱控制之后补加钙、镁、猛的复合液，孢子化发酵10‑25小时。丁酸梭菌利用该发酵方法抑制了发酵过程中乙酸的产生，有利于提高发酵终产物丁酸纯化和纯度，缩短了发酵时间。

技术领域

本发明属于微生物发酵工程领域，具体地说，涉及一种丁酸梭菌的新型发酵方法。

背景技术

丁酸梭菌可以作为饲料添加剂在饲料中应用，在动物肠道内可体现五大生物特性：一是促进动物肠道有益菌群的增殖和发育，抑制肠道内有害菌和腐败菌的生长、繁殖，纠正肠道菌群紊乱，减少肠毒素的发生；二是在动物肠道内能产生B族维生素、维生素K、淀粉酶等物质，具有保健作用；三是丁酸梭菌的主要代谢产物丁酸是肠道上皮组织细胞的再生和修复主要营养物质；四是厌氧或者兼性厌氧芽孢杆菌，不受胃酸、胆汁酸等影响；五是对多种饲用抗生素有较强的耐受性,可配伍使用。丁酸梭菌作为新饲料添加剂的使用，对于减少当前饲料中抗生素产品的滥用、减少药物在肉品中的残留、降低动物细菌的耐药性和保障动物健康方面有着重要的意义。

但是现有的丁酸梭菌在发酵过程中容易产生乙酸，导致发酵终产物丁酸的纯度降低，给人们的使用造成了一定的不便，实用性差。

发明内容

本发明的目的在于提供一种丁酸梭菌的新型发酵方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种丁酸梭菌的新型发酵方法，包括以下步骤：

S1、接种发酵：将丁酸梭菌种子液按照体积分数为5-10％的数量比接种至丁酸梭菌发酵培养基，在温度为35-40℃下培养10-20小时，使得丁酸梭菌快速适应，进入对数分裂期，制备丁酸梭菌的发酵液；

S2、补料发酵：在所述的步骤S1制备的丁酸梭菌发酵液中流加混合碳源，补料发酵12-24小时，在发酵开始后的12小时、16小时、20小时和24小时四个时间点等量流加糖，糖类总量为2％；

S3、补碱控制：经过步骤S2补料发酵后的丁酸梭菌发酵液在50-100r/min的搅拌速度下加入20％的碳酸钠控制丁酸梭菌发酵液pH为6.5；

S4、孢子化发酵：在所述的步骤S3补碱控制之后补加钙、镁、猛的复合液，孢子化发酵10-25小时。

作为本发明进一步方案：上述丁酸梭菌的新型发酵方法，包括以下步骤：

S1、接种发酵：将丁酸梭菌种子液按照体积分数为6-9％的数量比接种至丁酸梭菌发酵培养基，在温度为35-40℃下培养10-20小时，使得丁酸梭菌快速适应，进入对数分裂期，制备丁酸梭菌的发酵液；

S2、补料发酵：在所述的步骤S1制备的丁酸梭菌发酵液中流加混合碳源，补料发酵12-24小时，在发酵开始后的12小时、16小时、20小时和24小时四个时间点等量流加糖，糖类总量为2％；

S3、补碱控制：经过步骤S2补料发酵后的丁酸梭菌发酵液在60-90r/min的搅拌速度下加入20％的碳酸钠控制丁酸梭菌发酵液pH为6.5；

S4、孢子化发酵：在所述的步骤S3补碱控制之后补加钙、镁、猛的复合液，孢子化发酵10-25小时。

作为本发明再进一步方案：上述丁酸梭菌的新型发酵方法，包括以下步骤：