[发明专利]一种丁酸梭菌的新型发酵方法

权利要求书

1.一种丁酸梭菌的新型发酵方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、接种发酵：将丁酸梭菌种子液按照体积分数为5-10％的数量比接种至丁酸梭菌发酵培养基，在温度为35-40℃下培养10-20小时，使得丁酸梭菌快速适应，进入对数分裂期，制备丁酸梭菌的发酵液；

S2、补料发酵：在所述的步骤S1制备的丁酸梭菌发酵液中流加混合碳源，补料发酵12-24小时，在发酵开始后的12小时、16小时、20小时和24小时四个时间点等量流加糖，糖类总量为2％；

S3、补碱控制：经过步骤S2补料发酵后的丁酸梭菌发酵液在50-100r/min的搅拌速度下加入20％的碳酸钠控制丁酸梭菌发酵液pH为6.5；

S4、孢子化发酵：在所述的步骤S3补碱控制之后补加钙、镁、猛的复合液，孢子化发酵10-25小时。

2.根据权利要求1所述的一种丁酸梭菌的新型发酵方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、接种发酵：将丁酸梭菌种子液按照体积分数为6-9％的数量比接种至丁酸梭菌发酵培养基，在温度为35-40℃下培养10-20小时，使得丁酸梭菌快速适应，进入对数分裂期，制备丁酸梭菌的发酵液；

S2、补料发酵：在所述的步骤S1制备的丁酸梭菌发酵液中流加混合碳源，补料发酵12-24小时，在发酵开始后的12小时、16小时、20小时和24小时四个时间点等量流加糖，糖类总量为2％；

S3、补碱控制：经过步骤S2补料发酵后的丁酸梭菌发酵液在60-90r/min的搅拌速度下加入20％的碳酸钠控制丁酸梭菌发酵液pH为6.5；

S4、孢子化发酵：在所述的步骤S3补碱控制之后补加钙、镁、猛的复合液，孢子化发酵10-25小时。

3.根据权利要求1所述的根据权利要求1所述的一种丁酸梭菌的新型发酵方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、接种发酵：将丁酸梭菌种子液按照体积分数为8％的数量比接种至丁酸梭菌发酵培养基，在温度为35-40℃下培养10-20小时，使得丁酸梭菌快速适应，进入对数分裂期，制备丁酸梭菌的发酵液；

S2、补料发酵：在所述的步骤S1制备的丁酸梭菌发酵液中流加混合碳源，补料发酵12-24小时，在发酵开始后的12小时、16小时、20小时和24小时四个时间点等量流加糖，糖类总量为2％；

S3、补碱控制：经过步骤S2补料发酵后的丁酸梭菌发酵液在80r/min的搅拌速度下加入20％的碳酸钠控制丁酸梭菌发酵液pH为6.5；

S4、孢子化发酵：在所述的步骤S3补碱控制之后补加钙、镁、猛的复合液，孢子化发酵10-25小时。

4.根据权利要求1-3任一所述的一种丁酸梭菌的新型发酵方法，其特征在于，所述的丁酸梭菌发酵培养基的营养成分，按质量百分数计，包括以下组分：葡萄糖2.0％、氮源2.8％、酵母浸份1.8％、硫酸铵0.1％、碳酸氢钠0.124％、玉米浆粉0.33％，余量为无菌水。

5.根据权利要求1-3任一所述的一种丁酸梭菌的新型发酵方法，其特征在于，所述的步骤S1中丁酸梭菌种子液进入丁酸梭菌发酵培养基内以后按照转速80-160r/min的速度进行搅拌，所述的步骤S1在厌氧环境下培养；所述的步骤S1中丁酸梭菌发酵培养液的pH为6.0-6.5之间。

6.根据权利要求1-3任一所述的一种丁酸梭菌的新型发酵方法，其特征在于，所述的步骤S2中的糖类为葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和果糖中的一种或几种混合物。

7.根据权利要求1-3任一所述的一种丁酸梭菌的新型发酵方法，其特征在于，所述的步骤S2中丁酸梭菌发酵外源控制加入0.1％的乙酸钠。

8.根据权利要求1-3任一所述的一种丁酸梭菌的新型发酵方法，其特征在于，所述步骤S4复合液中钙、镁、猛离子分别占复合液质量分数为0.05％、0.02％、0.02％，其余为无菌水。