[发明专利]用于提取病毒核酸的试剂盒和方法

权利要求书

1.用于提取血筛混检样本中病毒核酸的试剂盒，其特征在于，包括裂解液、结合液、第一漂洗液、第二漂洗液、洗脱液、二氧化硅磁珠、蛋白酶K和核酸助沉剂，其中，所述第一漂洗液含有所述结合液和柠檬酸钠。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述裂解液含有高氯酸钠、Tris-HCl、EDTA、DTT和Triton X-100。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述结合液中含有高氯酸钠、DEPC水和无水乙醇。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述第二漂洗液中含有DEPC水和无水乙醇。

5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述洗脱液为Tris-HCl和DEPC水的溶液。

6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述蛋白酶K采用DEPC水溶解。

7.一种血筛混检样本中病毒核酸的提取方法，其特征在于，采用权利要求1～6任一项的试剂盒提取病毒核酸，具体包括如下步骤：

(1)样本准备：取灭活处理后的血清或血浆若干份，每份体积相同，分别标记和编号，将若干份血清或血浆合并成1份待测样本；

(2)设置阳性对照和阴性对照样本；

(3)核酸提取阶段：

1)向深孔板1中加入第一漂洗液，放到核酸提取仪器相应卡槽上；

2)向深孔板2中加入第二漂洗液，放到核酸提取仪器相应卡槽上；

3)向洗脱管中加入洗脱液，放到核酸提取仪器相应卡槽上；

4)将磁力套板放到核酸提取仪器相应卡槽上；

5)往深孔板3中依次加入所述待检测样本、蛋白酶K溶液、核酸助沉剂和裂解液；

6)核酸提取仪器初始化，然后按设定提取程序进行样本裂解；

7)裂解完成后，核酸提取仪器暂停；

8)取出深孔板3，依次加入纳米磁珠，结合液；

9)继续运行核酸提取仪器，直至提取完成。

8.根据权利要求7所述的提取方法，其特征在于，所述步骤(1)中待测样本体积为2.4mL；不足2.4mL的待测样本用经鉴定后的阴性空白血浆补足。

9.一种快速检测血浆\血清中病毒的方法，其特征在于，包括如下步骤：将12人份的血浆/血清样品合并为一个检测样本，采用权利要求1～6任一项的试剂盒进行提取，若提取的核酸经PCR检测相应的病毒DNA/RNA为阴性，则判定为该12个人的血浆/血清样品为阴性；若出现阳性结果，则分别采用PCR检测各人的血浆/血清样本。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述PCR为荧光定量PCR。