[发明专利]猕猴ROSA26基因及其基因修饰的方法和应用在审
申请号: | 201810392625.5 | 申请日: | 2018-04-27 |
公开(公告)号: | CN110408621A | 公开(公告)日: | 2019-11-05 |
发明(设计)人: | 李顺;周晓辉;陈丽香;彭秀华 | 申请(专利权)人: | 上海市公共卫生临床中心 |
主分类号: | C12N15/12 | 分类号: | C12N15/12;C12N15/10;C12N15/85;C12N15/90 |
代理公司: | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 | 代理人: | 吴桂琴 |
地址: | 201508 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 猕猴 基因 基因修饰 猕猴模型 生物技术领域 转基因修饰 疾病模型 体系构建 外源基因 稳定表达 表型 位点 制备 应用 | ||
1.一种猕猴ROSA26基因,其特征在于,其包括SEQ ID NO 4中1-428位DNA序列。
2.如权利要求1所述的猕猴ROSA26基因,其特征在于,其序列如SEQ ID NO 4所示。
3.制备权利要求1所述猕猴ROSA26基因的方法,其特征在于,该方法包括:
(a)使用人或者鼠的ROSA26序列比对猕猴的基因组序列,电子克隆猕猴ROSA26的序列;
和/或
(b)针对猕猴ROSA26的序列设计引物,通过聚合酶链反应获得猕猴ROSA26基因。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤(b)中,以猕猴体细胞RNA为模板,反转录成cDNA后,用3’RACE克隆试剂盒结合巢式PCR扩增出猕猴ROSA26基因的全长序列。
5.权利要求1所述的基因在基因编辑修饰中的应用,其特征在于,根据权利要求1所述的基因的序列设计猕猴ROSA26基因的修饰靶点。
6.如权利要求5所述的应用,其特征在于,针对所述的修饰靶点设计并合成寡核苷酸,对猕猴ROSA26基因进行修饰。
7.如权利要求6所述的应用,其特征在于,将所述的寡核苷酸构建质粒后再对猕猴ROSA26基因进行修饰。
8.如权利要求7所述的应用,其特征在于,所述的质粒含有绿色荧光蛋白的编码序列。
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