[发明专利]猕猴ROSA26基因及其基因修饰的方法和应用在审

专利信息
申请号: 201810392625.5 申请日: 2018-04-27
公开(公告)号: CN110408621A 公开(公告)日: 2019-11-05
发明(设计)人: 李顺;周晓辉;陈丽香;彭秀华 申请(专利权)人: 上海市公共卫生临床中心
主分类号: C12N15/12 分类号: C12N15/12;C12N15/10;C12N15/85;C12N15/90
代理公司: 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 代理人: 吴桂琴
地址: 201508 上*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 猕猴 基因 基因修饰 猕猴模型 生物技术领域 转基因修饰 疾病模型 体系构建 外源基因 稳定表达 表型 位点 制备 应用
【权利要求书】:

1.一种猕猴ROSA26基因,其特征在于,其包括SEQ ID NO 4中1-428位DNA序列。

2.如权利要求1所述的猕猴ROSA26基因,其特征在于,其序列如SEQ ID NO 4所示。

3.制备权利要求1所述猕猴ROSA26基因的方法,其特征在于,该方法包括:

(a)使用人或者鼠的ROSA26序列比对猕猴的基因组序列,电子克隆猕猴ROSA26的序列;

和/或

(b)针对猕猴ROSA26的序列设计引物,通过聚合酶链反应获得猕猴ROSA26基因。

4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤(b)中,以猕猴体细胞RNA为模板,反转录成cDNA后,用3’RACE克隆试剂盒结合巢式PCR扩增出猕猴ROSA26基因的全长序列。

5.权利要求1所述的基因在基因编辑修饰中的应用,其特征在于,根据权利要求1所述的基因的序列设计猕猴ROSA26基因的修饰靶点。

6.如权利要求5所述的应用,其特征在于,针对所述的修饰靶点设计并合成寡核苷酸,对猕猴ROSA26基因进行修饰。

7.如权利要求6所述的应用,其特征在于,将所述的寡核苷酸构建质粒后再对猕猴ROSA26基因进行修饰。

8.如权利要求7所述的应用,其特征在于,所述的质粒含有绿色荧光蛋白的编码序列。

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