[发明专利]一种含有菊苣营养成分的解酒护肝剂及其制备方法

权利要求书

1.一种含有菊苣营养成分的解酒护肝剂的制备方法，其特征在于所述方法步骤如下：

步骤一、制备菊苣低聚肽和菊苣香豆素：

(1)、原料预处理：

将新鲜菊苣根清洗后切成小块，充分干燥后粉碎至80目，将菊苣粉与水混合，得到菊苣粉悬浮液，向菊苣粉悬浮液中加入非蛋白复合酶，一定温度且全程搅拌下酶水解一定时间，升温使复合酶失活，制得菊苣破壁悬浮液；

(2)、制备菊苣蛋白粗提液：

按一定体积比向步骤(1)得到的菊苣破壁悬浮液中加入pH值为中性的Tris-HCl缓冲溶液，搅拌均匀后于一定温度下搅拌浸提，收集浸提液；重复浸提一次并将两次浸提液合并，用滤膜将浸提液过滤，收集澄清滤液并置于超滤膜装置进行超滤，收集截留液即为菊苣蛋白粗提液；

(3)、酶解菊苣蛋白粗提液制备菊苣低聚肽：

将步骤(2)得到的菊苣蛋白粗提液浓缩至原来体积的1/5，冷却至室温，得到菊苣蛋白浓缩液，将浓缩液pH值调至8.5～9.5，加入碱性蛋白酶，在一定温度下进行酶解，酶解过程中滴加NaOH溶液维持体系pH值，酶解完成后向酶解体系中加入HCl将体系pH调至5～7，加入中性蛋白酶，在一定温度下完成酶解后升温使蛋白酶失活，自然冷却至室温后调节pH值为中性，得到酶解液；利用SephadexG-25将酶解液中得到的酶解蛋白分级，收集分子量为500～1000Da的菊苣低聚肽，采用真空干燥法制得菊苣低聚肽粉；

(4)、提取菊苣香豆素：

收集步骤(2)滤膜过滤浸提液后的滤渣，按一定质量体积比向其中加入乙醇，采用加热回流提取的方法提取菊苣香豆素，提取2～3次，合并提取液得到菊苣香豆素粗提液；向所述菊苣香豆素粗提液中加入NaOH，边加边搅拌，将pH值调至7～8，过滤除去杂质，收集滤液并向其中加入盐酸，边加边搅拌，将pH值调至2～3，反应体系置于4℃冷藏20～24h后抽滤处理，收集滤渣并真空干燥制得菊苣香豆素；

步骤二、制备中药提取物：

将充分干燥的葛根花、葛根、三七、水飞蓟、菊花、枳子、肉豆蔻分别粉碎至50～80目，将所得上述各中药粉末按任意比例混合制成中药混合物粉末，取100g中药混合物粉末放入1L萃取釜进行萃取，超临界CO₂流体萃取操作流程为液态CO₂→高压泵→萃取釜进入超临界状态→分离釜Ⅰ→分离釜Ⅱ→循环；在一定CO₂流体流量、萃取釜温度、萃取压力和分离釜Ⅰ、分离釜Ⅱ压力、分离釜温度下进行萃取，萃取过程中使用无水乙醇作为夹带剂，无水乙醇用量为500mL，萃取2～3h即得中药提取物；

步骤三、制备解酒护肝剂：

称取如下重量份的原料：菊苣低聚肽30～80份、菊苣香豆素6～10份、中药提取物20～30份、蜂蜜10～20份和去离子水200份，经搅拌混合均匀后过滤除杂、灌装、高温灭菌，即制得所述含有菊苣营养成分的解酒护肝剂。

2.根据权利要求1所述一种含有菊苣营养成分的解酒护肝剂的制备方法，其特征在于步骤一(1)所述非蛋白复合酶是由纤维素酶、果胶酶和淀粉酶按配比1～5:1～3:1～4组成，非蛋白复合酶的添加量为菊苣粉质量的0.1～0.8％，所述酶水解温度为35～42℃，所述搅拌转速为40～50rpm，所述酶水解时间为6h，所述使复合酶失活是将酶解体系温度升至90～100℃并保持10分钟使复合酶失活。

3.根据权利要求1或2所述一种含有菊苣营养成分的解酒护肝剂的制备方法，其特征在于步骤一(2)所述菊苣破壁悬浮液与Tris-HCl缓冲溶液的体积比为1:10～15；所述Tris-HCl缓冲溶液的摩尔浓度为0.01mol/L；所述搅拌浸提的温度为4℃，搅拌浸提时间为3～6h，所述滤膜为0.45μm滤膜，所述超滤的截留分子量为30000Da。

4.根据权利要求3所述一种含有菊苣营养成分的解酒护肝剂的制备方法，其特征在于步骤一(3)所述碱性蛋白酶的加酶量为菊苣蛋白浓缩液重量的0.03～0.06％，酶解温度为55～70℃，酶解时间为1～2h；所述中性蛋白酶的加酶量为菊苣蛋白浓缩液重量的0.2～0.3％，酶解温度为50～60℃，酶解时间为1～2h，所述使蛋白酶失活是将酶解体系温度升至90～100℃并保持10分钟使蛋白酶失活，所述真空干燥条件均为65℃，0.08MPa压力下干燥3h。