[发明专利]一种生产磷脂酰基γ-羟基丁酸的方法

说明书

本发明提供了一种生产磷脂酰基γ‑羟基丁酸的方法，包括步骤：1)将磷脂吸附于载体表面，得吸附了磷脂的载体；2)以吸附了磷脂的载体与γ‑羟基丁酸和/或γ‑羟基丁酸钠在磷脂酶D催化下进行水‑固表面磷脂酰基转移反应，合成磷脂酰基γ‑羟基丁酸；3)洗脱剂洗脱吸附在载体上的磷脂酰基γ‑羟基丁酸，得到磷脂酰基γ‑羟基丁酸。本发明提供的生产磷脂酰基γ‑羟基丁酸的方法，采用在水‑固反应体系中通过磷脂酰基化转移合成PB，避免了大量有毒有机溶剂的使用，降低了产品溶剂残留，使反应过程更绿色安全。

技术领域

本发明属于磷脂类物质合成技术领域，涉及一种生产磷脂酰基γ-羟基丁酸的方法。

背景技术

γ-羟基丁酸，又称4-羟基丁酸(简称GHB或4HB)。它能促进生长素释放并对中枢神经系统有较强的抑制作用，是一种二类精神药物。临床上可将它作为麻醉剂和催眠剂用于手术操作。研究表明，GHB在体内被代谢为水和二氧化碳，毒性小，安全范围大。作为静脉麻醉药物具有术后平稳，恢复期短，并发症少等优点。因此，GHB在医学上有很重要的应用潜力。然而GHB是一种低效能的静脉麻醉剂，消除动力学研究表明，GHB摄入后的吸收和消除都非常迅速，很少有蓄积作用，导致它在手术中的麻醉时间过短。所以，GHB并不能单独使用，只能作为附加麻醉剂和催眠剂应用。因此，采取相应手段对GHB进行前体药物结构设计，通过体内释放控制它的消除速率，延长麻醉时效是十分重要的。

磷脂是构成生物膜的基础组成物质，含有两条疏水的脂肪酸链和亲水的功能性头部基团，具有很高的脂溶性，能够迅速穿过血脑屏障而被吸收。因而，以磷脂酰基与GHB结合生成的磷脂酰基γ-羟基丁酸(PB)可望作为药物前体输送γ-羟基丁酸摄入人体，并通过体内代谢缓慢分解而释放出GHB，对GHB有一定蓄积作用。故可将磷脂酰基γ-羟基丁酸作为GHB的前体药物来弥补其麻醉时效过短的不足。因此，PB合成是是重要的药物制备技术。。韩国学者曾报道以磷脂酶D(phospholipase D，PLD)催化的磷脂酰基转移反应合成PB，反应在双液相体系中进行[Lee和Choi,1996]。有机溶媒-水双液相磷脂酰基转移反应体系最大的缺陷是产物收率较低，分离困难，且使用大量有毒有机溶剂，会使产品产生有溶剂残留而增加安全隐患。因此，有必要对磷脂酶D催化合成PB的生产工艺进行改进，探索一种在保证获得高纯度产品的同时，也能避免在合成过程中使用有机溶剂的新方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种生产磷脂酰基γ-羟基丁酸的方法，以达到提高PB产率的同时还能够避免反应过程中有机溶剂的使用，以便降低生产成本，确保产品安全。

本发明是通过以下技术方案来实现：

一种生产磷脂酰基γ-羟基丁酸的方法，包括步骤：

1)将磷脂吸附于载体表面，得吸附了磷脂的载体；

2)以吸附了磷脂的载体与γ-羟基丁酸和/或γ-羟基丁酸盐在磷脂酶D催化下进行水-固表面磷脂酰基转移反应，合成磷脂酰基γ-羟基丁酸；所述磷脂酶D为具有磷脂酰基转移活力的磷脂酶D；

3)洗脱剂洗脱吸附在载体上的磷脂酰基γ-羟基丁酸，得到磷脂酰基γ-羟基丁酸。

优选地，所述磷脂酶D来源于卷心菜、链霉菌菌株或分子改造获得的磷脂酶D。

优选地，在步骤1)中，所述磷脂为磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰甘油(PG)和卵磷脂中的一种或多种。

进一步优选地，所述磷脂为PC-90。

优选地，在步骤1)中，所述载体为纳米二氧化硅、介孔硅胶、硫酸钙、纤维素微晶和活性炭粒子中的一种或多种。

进一步优选地，所述载体为纳米二氧化硅。

优选地，在步骤1)中，先把磷脂的有机溶液和载体混合后搅拌，再加入沉淀剂并搅拌，分离得到吸附了磷脂的载体。