[发明专利]一种用于工业生产的哺乳动物细胞表达载体

权利要求书

1.一种用于哺乳动物宿主细胞表达蛋白/多肽的表达载体，包含标记基因和用于插入目的基因的限制性内切酶酶切位点，其特征在于，目的基因后的Poly(A)加尾信号数量为2个或2个以上，标记基因的启动元件为核苷酸序列为“TATATAA”的TATA框。

2.根据权利要求1所述的表达载体，其特征在于，限制性内切酶酶切位点前还包括带有外泌信号肽的且失去与细胞直接结合能力的截短白喉毒素的编码基因；目的基因为单链抗体基因或多肽类配体基因。

3.据权利要求1或2所述的表达载体，其特征在于，TATA框选自CMV的TATA框。

4.根据权利要求1或2所述的表达载体，其特征在于，所述Poly(A)加尾信号选自病毒、原核/真核生物的，修饰或改造的病毒、原核/真核生物的和人工合成的Poly(A)加尾信号中的至少一种；数量为3个。

5.根据权利要求1或2所述的表达载体，其特征在于，标记基因选自DHFR基因、GS基因或耐抗生素基因。

6.根据权利要求1或2所述的表达载体，其特征在于，哺乳动物宿主细胞为CHO细胞系，NSO细胞系，BHK细胞系，Vero细胞系，PER C6细胞系或HEK 293细胞系。

7.根据权利要求2所述的表达载体，其特征在于，哺乳动物宿主细胞为对相应的毒素有抵抗力的CHO细胞系或HEK 293细胞系。

8.根据权利要求1所述的表达载体，其特征在于，所述目的基因包括但不限于编码单链抗体、激素、外毒素、干扰素和含外毒素的融合蛋白的基因。

9.根据权利要求1所述的表达载体，其特征在于，目的基因为单链单价抗人血小板糖蛋白VI抗体。

10.根据权利要求2所述的表达载体，其特征在于，蛋白/多肽为外泌型的含有截短白喉毒素的具有与Her2或EGFRvIII受体特异性结合的免疫毒素。