[发明专利]一种高效微藻滴灌肥的制备方法

权利要求书

1.一种高效微藻滴灌肥的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

A.小球藻活菌液的制备

（1）培养获得细胞浓度达2×10⁸个/mL以上的小球藻液体培养物；

（2）将小球藻液体培养物和功能化离子液体按照体积比（6~8）:（2~4）在25~30℃、0.1~0.5Mpa下充分混合后放置12h，得到小球藻活菌液；

所述的功能化离子液体为氨基化离子液体、氟烷基化离子液体、氰基化离子液体中的一种；

B.混合藻发酵液的制备

（1）按重量份数比，取海带粉10~20份，褐藻酸溶液20~30份，细胞浓度达1×10⁸个/mL以上的小球藻液体培养物50~60份进行混合得到混合液；

（2）于混合液中加入其质量2~3倍的Basal液体培养基，接种0.1%~0.5%复合菌，在28~32℃、140~220r/min、2000~4000lux光照下连续发酵20~30h，即可得到混合藻发酵液；

所述复合菌含有以下菌类：黑曲霉、米曲霉和绿色木霉；

C.滴灌肥的制备

按重量百分比计，取上述小球藻活菌液40%~50%、混合藻发酵液6%~10%、褐藻酸1%~5%、硫酸铵1%~5%、氯化钾1%~5%、硫酸镁1%~5%、黄腐酸钾5%~10%、余量为水进行混合，即得高效持久微藻活菌滴灌肥。

2.如权利要求1所述的一种高效微藻滴灌肥的制备方法，其特征在于，所述的Basal培养基含有以下浓度的物质：葡萄糖 20~50g/L，NaNO₃ 1250~3750mg/L，KH₂PO₄ 1250mg/L，MgSO₄·7H₂O 1000mg/L，EDTA 500mg/L，H₃BO₃ 114.2mg/L，CaCl₂·2H₂O 111mg/L，FeSO₄·7H₂O 49.8mg/L，ZnSO₄·7H₂O 88.2mg/L，MnCl₂·4H₂O 14.2mg/L，Na₂MoO₄·2H₂O 11.92mg/L，CuSO₄·5H₂O 15.7mg/L，Co(NO₃)₂·6H₂O 4.9 mg/L，pH为6.1。

3.如权利要求1所述的一种高效微藻滴灌肥的制备方法，其特征在于，所述复合菌由2×10⁷~5×10⁷个/mL孢子悬浮液的米曲霉、2×10⁷~5×10⁷个/mL孢子悬浮液的黑曲霉和1×10⁷~1.5×10⁷个/mL孢子悬浮液的绿色木霉按照体积比1:1:5混合而成。

4.如权利要求1所述的一种高效微藻滴灌肥的制备方法，其特征在于，所述的氨基化离子液体为1-（3-氨基丙基）-3丁基咪唑四氟硼酸盐（[NH₂p-bim][BF₄]）、1-氨丙基-3-甲基咪唑溴盐([APMIm][Br])中一种。

5.如权利要求1所述的一种高效微藻滴灌肥的制备方法，其特征在于，所述的氟烷基化离子液体为N-氨丙基-3-甲基咪唑三氟甲砜（[H₂NC₃H₆mim][CF₃SO₃]）、N-氨丙基-3-甲基咪唑双（三氟甲磺酰）亚胺（[H₂NC₃H₆mim][Tf₂N]）中的一种。

6.如权利要求1所述的一种高效微藻滴灌肥的制备方法，其特征在于，所述的氰基化离子液体为1-丁基-三甲基咪唑二氰胺(［bmim］［N(CN)₂］)、1-乙基-3甲基咪唑四氰硼酸盐（[emim][B(CN)₄]）中一种。