[发明专利]一种用于检测罗湖病毒的环介导等温扩增引物组及试剂盒在审
申请号: | 201810319745.2 | 申请日: | 2018-04-11 |
公开(公告)号: | CN108315486A | 公开(公告)日: | 2018-07-24 |
发明(设计)人: | 张薇;王振超;徐万果 | 申请(专利权)人: | 张薇 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/93 |
代理公司: | 北京久维律师事务所 11582 | 代理人: | 邢江峰 |
地址: | 650000 云南省昆明市盘龙区*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 试剂盒 引物组 环介导等温扩增 检测 第二引物 第三引物 第一引物 病毒 试剂技术领域 阳性对照液 阴性对照液 病毒治疗 定性检测 检测反应 逆转录酶 专业要求 罗非鱼 浓缩液 引物 灵敏 感染 保证 | ||
1.一种用于检测罗湖病毒的环介导等温扩增引物组,其特征在于,所述的环介导等温扩增引物组由第一引物组、第二引物组和第三引物组按照1:1:1的比例混合而成。
2.根据权利要求1所述的一种用于检测罗湖病毒的环介导等温扩增引物组,其特征在于,所述的第一引物组包括第一上游引物和第一下游引物,所述的第一上游引物的DNA序列为5’-GAATAATAAAGTGAGCTTAAG-3’,所述的第一下游引物的DNA序列为5’-CAGGGAAAGTACTGCATAGCG-3’;所述的第一引物组中的第一上游引物和第一下游引体积比为1:1。
3.根据权利要求1所述的一种用于检测罗湖病毒的环介导等温扩增引物组,其特征在于,所述的第二引物组包括第二上游引物和第二下游引物,所述的第二上游引物的DNA序列为5’-AGCCTAGCAACTGTACAATCG-3’,所述的第二下游引物的DNA序列为5’-GACGCTACGATCAGTACACGA-3’,所述的第二引物组中的第二上游引物和第二下游引体积比为1:1。
4.根据权利要求1所述的一种用于检测罗湖病毒的环介导等温扩增引物组,其特征在于,所述的第三引物组包括第三上游引物和第三下游引物,所述的第三上游引物的DNA序列为5’-CCGATTAGTCGATGAGATGCA-3’,所述的第三下游引物的DNA序列为5’-GCAATGCATACGGATCGACGA-3’,所述的第三引物组中的第三上游引物和第三下游引体积比为1:1。
5.一种含有权利要求1所述环介导等温扩增引物组的试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒包括:40nmol的第一引物组、5nmol的第二引物组、20nmol的第三引物组、15μL的反应浓缩液、20μL的阳性对照液、20μL的阴性对照液和1μL的逆转录酶。
6.根据权利要求5所述的一种含有环介导等温扩增引物组的试剂盒,其特征在于,所述的反应浓缩液包括聚合酶、Buffer、dNTP、MgSO4、Betaine、荧光染料Evagreen。
7.根据权利要求5所述的一种含有环介导等温扩增引物组的试剂盒,其特征在于,所述的阳性对照液为含有罗湖病毒目的基因的大肠杆菌质粒DNA。
8.根据权利要求5所述的一种含有环介导等温扩增引物组的试剂盒,其特征在于,所述的阴性对照液为不含有罗湖病毒目的基因的大肠杆菌质粒DNA。
9.根据权利要求5所述的一种含有环介导等温扩增引物组的试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒中第一引物组、第二引物组、第三引物组、反应浓缩液、阳性对照液、阴性对照液和逆转录酶在使用前分别包装在不同的包装中。
10.根据权利要求5所述的一种含有环介导等温扩增引物组的试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒与等温扩增荧光检测仪、定量PCR仪或恒温金属浴配合使用。
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