[发明专利]血清中蔗糖测定方法

说明书

本发明公开了一种血清中蔗糖测定方法，属于利用可见光，通过测试反应的结果产生颜色变化来测试材料的方法。本发明的技术方案是：工具酶及指示酶同在试剂I中，试剂II仅有蔗糖酶有效成分；其测定方法为：血清中葡萄糖先与试剂Ⅰ于37℃温浴3～5分钟，血清中葡萄糖与试剂Ⅰ反应生成醌亚胺，加入试剂Ⅱ后于37℃温浴4～7分钟，蔗糖在蔗糖酶的作用下水解生成α‑D‑葡萄糖和β‑D‑果糖，水解生成的α‑D‑葡萄糖与试剂Ⅰ反应产生醌亚胺。仪器在540nm波长处检测，以试剂Ⅰ反应产生的醌亚胺为空白，由试剂Ⅱ反应产生的醌亚胺计算出蔗糖的含量。本发明检测时不受内源性葡萄糖影响，其方法经济方便易行，不需要特殊检测设备，是一种准确性更高的蔗糖检测方法。

技术领域

本发明属于一种包含酶的测定方法；或是利用可见光，通过测试反应的结果产生颜色变化来测试材料的方法，特别是涉及一种用生化分析仪快捷、准确检测血清中蔗糖的测定方法。

背景技术

蔗糖最主要的功效就是为人类身体补充能量，它进入人体以后很容易被吸收和利用，能很快转化成能量，从而也就减少了疲劳症状的发生，蔗糖味甜，对人类身体有多种好处，但是它在食用时却有一些禁忌，最重要的一点就是那些患有高血溏和糖尿病的人群不能食用，不然会让身体的血糖指数快速升高，对病情控制不利，会严重伤害人们的身体健康。蔗糖在人体消息化系统内经过消化液分解产生等量的α-D-葡萄糖和β-D-果糖。纯净的蔗糖是无色晶体易溶于水，比葡萄糖、麦芽糖甜，但不如果糖甜。蔗糖是由一分子葡萄糖和一分子果糖缩合失去一分子水而成，葡萄糖分子中的醛基和果糖分子中的酮基都被破坏，因此没有还原性，属非还原性二糖。蔗糖在酸或蔗糖酶的作用下，水解生成等量的葡萄糖和果糖。葡萄糖、果糖、蔗糖它们的区别在于：

1、葡萄糖(是一种六碳一元醛糖，水溶液中存在缩合平衡：大部分分子内醛基和5-羟基发生缩合形成吡喃糖，含苷羟基)分子中含有醛基(-CHO)或苷羟基，具有还原作用，是最典型的还原性糖。

2、果糖(是一种六碳一元酮糖，水溶液中存在缩合平衡：部分分子内酮基和4-羟基发生缩合形成呋喃糖，不含醛基或苷羟基)分子中虽然不含有上述基团，但在水溶液非酸性环境下存在平衡能部分转化为醛糖(甘露糖/葡萄糖)和醛(甲醛；副产物二羟基丙酮,是最简单的酮糖,非还原性糖)，转化产物中含醛基,所以果糖也是还原性糖。

3、一分子蔗糖(α-D-葡萄吡喃苷基-β-D-呋喃果糖苷)由一分子β-D-呋喃果糖和一分子α-D-吡喃葡萄糖缩合(脱1分子H₂O)形成，其中不含醛基或苷羟基，因此不是还原糖。

蔗糖是由α-D-葡萄糖和β-D-果糖以α-1，2糖苷键构成，其水解方程式为：

葡萄糖与果糖互为同分异构体，葡萄糖是一种多羟基醛(醛糖)，果糖是一种多羟基酮(酮糖)，果糖分子中并无醛基存在，它们的结构式及反应产物如图1所示。

葡萄糖米氏常数为1.5×10^-2M，分子量342.3。无色晶体，具有旋光性，但无变旋。蔗糖的分子式：C₁₂H₂₂O₁₁。蔗糖容易被酸水解，水解后产生等量的α-D-葡萄糖和β-D-果糖。易溶于水较难溶于乙醇。