[发明专利]一种采用高效液相色谱检测磺胺类抗生素的方法及应用

权利要求书

1.一种采用高效液相色谱检测磺胺类抗生素的方法，其特征在于，具体包括如下步骤：

(1)色谱条件：

色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的C8或C18反相色谱柱；

检侧器：紫外检测器或二极管阵列检测器；

检测波长：选用250-380nm波长作为检测波长：

流动相：采用甲酸水溶液和乙睛作为流动相，平衡色谱柱，使基线平稳；

流速：0.5-1.5ml/min；

柱温：15-35℃；

(2)绘制标准曲线，拟合标准曲线方程：磺胺类抗生素标准品溶解于超纯水中，并利用超纯水稀释配制成浓度在0.01mg/L-10mg/L之间不同梯度浓度的磺胺类抗生素标准溶液，过滤后利用高效液相色谱法进行检测，以色谱峰面积为纵坐标、以磺胺类抗生素标准溶液浓度为横坐标将高效液相色谱法检测绘制成标准曲线，然后进行拟合，得到标准曲线方程：Y＝kX+b，方程中Y表示色谱峰面积，X表示磺胺类抗生素的浓度，k和b为常数；

(3)样品预处理：把吸附剂处理过的混合液体离心后过滤备用；

(4)样品检测：

取预处理好的样品进样，然后再取磺胺类抗生素标准溶液进样；

依照上述色谱条件进行检测，分别得到样品的色谱图和磺胺类抗生素标准品的色谱图，将样品的色谱图和标准品的色谱图进行比较，通过两者的保留时间定性样品中磺胺类抗生素；

将样品中磺胺类抗生素的色谱峰面积带入上述标准曲线方程中，计算样品中磺胺类抗生素的浓度。

2.根据权利要求1所述的一种采用高效液相色谱检测磺胺类抗生素的方法及应用，其特征在于，所述磺胺类抗生素包括磺胺嘧啶，磺胺甲恶唑，磺胺间甲氧嘧啶，磺胺咇啶，磺胺甲嘧啶或磺胺二甲嘧啶。

3.根据权利要求1所述的一种采用高效液相色谱检测磺胺类抗生素的方法及应用，其特征在于，步骤(1)中检测波长为265-272nm。

4.根据权利要求1所述的一种采用高效液相色谱检测磺胺类抗生素的方法及应用，其特征在于，步骤(1)中流动相为体积比为(14-40):(60-86)的甲酸水溶液和乙腈，其中甲酸水溶液的质量浓度为0.01-1％。

5.根据权利要求1所述的一种采用高效液相色谱检测磺胺类抗生素的方法及应用，其特征在于，步骤(1)中流动相流速为1ml/min，柱温为30℃。

6.根据权利要求1所述的一种采用高效液相色谱检测磺胺类抗生素的方法及应用，其特征在于，步骤(2)中标准曲线的浓度梯度为：0.3mg/L、0.5mg/L、0.8mg/L、1mg/L、1.5mg/L、2mg/L。

7.根据权利要求1所述的一种采用高效液相色谱检测磺胺类抗生素的方法及应用，其特征在于，步骤(2)和步骤(3)中过滤是指采用0.45μm针头过滤器过滤。

8.根据权利要求1所述的一种采用高效液相色谱检测磺胺类抗生素的方法及应用，其特征在于，步骤(3)中混合液体离心是指移至离心管中，用12000rpm/min离心5min。

9.根据权利要求1所述的一种采用高效液相色谱检测磺胺类抗生素的方法及应用，其特征在于，步骤(4)中保留时间定性是指样品和标准品保留时间误差范围在±0.5分钟以内，当使用二极管阵列检测器时进一步通过磺胺类抗生素标准品的最大吸收波长及光谱图特征进行样品中磺胺类抗生素定性分析。

10.权利要求1至9中任一种采用高效液相色谱检测磺胺类抗生素的方法在生态环境中磺胺类抗生素残留检测中的应用。