[发明专利]一种异亮氨酸双加氧酶突变体及其应用有效
申请号: | 201810290466.8 | 申请日: | 2018-04-03 |
公开(公告)号: | CN108504639B | 公开(公告)日: | 2020-12-29 |
发明(设计)人: | 史锋;黄森;李永富 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N9/02 | 分类号: | C12N9/02;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12P13/04;C12P7/46 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 张勇 |
地址: | 214122 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 异亮氨酸 双加氧酶 突变体 及其 应用 | ||
1.一种异亮氨酸双加氧酶突变体,其特征在于,氨基酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ IDNO.3所示。
2.编码权利要求1所述异亮氨酸双加氧酶突变体的基因。
3.携带权利要求2所述异亮氨酸双加氧酶突变体的基因的载体。
4.表达权利要求1所述异亮氨酸双加氧酶突变体的细胞。
5.一种基因工程菌,其特征在于,表达权利要求1所述的异亮氨酸双加氧酶突变体。
6.根据权利要求5所述的基因工程菌,其特征在于,以大肠杆菌为宿主,以pET系列质粒为表达载体。
7.根据权利要求6所述的基因工程菌,其特征在于,将SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.4所示的基因在大肠杆菌中表达。
8.一种提高异亮氨酸双加氧酶催化效率的方法,其特征在于,将Genbank登录号ABY46544.1的异亮氨酸双加氧酶去掉N端2~7位的六个氨基酸残基,将第126位的天冬酰胺替换为组氨酸,还将第130位的苏氨酸替换为赖氨酸。
9.一种生产4-羟基异亮氨酸的方法,其特征在于,以L-异亮氨酸、α-酮戊二酸为底物,应用权利要求5~7任一所述的基因工程菌为催化剂进行催化反应。
10.权利要求1所述的异亮氨酸双加氧酶突变体在制备含4-羟基异亮氨酸或琥珀酸的产品方面的应用。
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