[发明专利]葡萄霜霉病菌离体保存方法在审
| 申请号： | 201810252937.6 | 申请日： | 2018-03-26 |
| 公开（公告）号： | CN108485978A | 公开（公告）日： | 2018-09-04 |
| 发明（设计）人： | 宋双;姜彩鸽;张怡;王国珍;樊仲庆;张华普 | 申请（专利权）人： | 宁夏农林科学院植物保护研究所（宁夏植物病虫害防治重点实验室） |
| 主分类号： | C12N1/04 | 分类号： | C12N1/04;C12R1/645 |
| 代理公司： | 宁夏合天律师事务所 64103 | 代理人： | 杨丽坤;孙彦虎 |
| 地址： | 750002 宁夏回族*** | 国省代码： | 宁夏;64 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 葡萄霜霉病菌 保存 离体保存 致病性 保存处理 霜霉病菌 琼脂粉 孢子囊 包埋 回接 叶片 葡萄 健康 | ||
1.一种霜霉病菌离体保存方法，其特征在于：将离体的霜霉病菌包埋在琼脂粉中后置于低于-20℃的环境保存。
2.根据权利要求1所述的霜霉病菌离体保存方法，其特征在于：置于-80℃的环境保存。
3.根据权利要求2所述的霜霉病菌离体保存方法，其特征在于，所述离体的霜霉病菌获得的步骤为：采集生长良好且感染霜霉病的单斑病叶，冲洗掉病叶表面杂物和原有的霜霉病菌霉层，然后将病叶置于铺有湿润纱布或滤纸的容器内，叶片背面朝上，用浸湿的棉花包裹叶柄，用滤纸吸干病叶表面残留的水珠，保鲜膜封住容器开口，蒙上黑布置于室温条件下保湿培养，待到病叶上生长出新的白色霜霉层后，用消毒后的剪刀将带有病斑的病叶剪下，得到离体的霜霉病菌。
4.根据权利要求3所述的霜霉病菌离体保存方法，其特征在于：所述冲洗掉表面残留的霜霉病菌霉层过程使用的是无菌蒸馏水；所述纱布、滤纸、容器、棉花均经过消毒处理，达到无菌状态；所述蒙上黑布置于室温条件下保湿培养过程是置于20℃±2℃，湿度90％以上，黑暗的条件下保湿培养24～36h。
5.根据权利要求1～4中任意一项所述的霜霉病菌离体保存方法，其特征在于：所述保存时间不超过120天；且最佳保存时间不超过90天。
6.一种葡萄霜霉病菌离体保存方法，其特征在于：将离体的葡萄霜霉病菌包埋在琼脂粉中后置于低于-20℃的环境保存。
7.根据权利要求6所述的葡萄霜霉病菌离体保存方法，其特征在于：置于-80℃的环境保存。
8.根据权利要求7所述的葡萄霜霉病菌离体保存方法，其特征在于，所述离体的葡萄霜霉病菌获得的步骤为：采集生长良好且感染葡萄霜霉病的单斑病叶，冲洗掉病叶表面杂物和原有的葡萄霜霉病菌霉层，然后将病叶置于铺有湿润纱布或滤纸的容器内，叶片背面朝上，用浸湿的棉花包裹叶柄，用滤纸吸干病叶表面残留的水珠，保鲜膜封住容器开口，蒙上黑布置于室温条件下保湿培养，待到病叶上生长出新的白色霜霉层后，用消毒后的剪刀将带有病斑的病叶剪下，得到离体的葡萄霜霉病菌。
9.根据权利要求8所述的葡萄霜霉病菌离体保存方法，其特征在于：所述冲洗掉表面残留的葡萄霜霉病菌霉层过程使用的是无菌蒸馏水；所述纱布、滤纸、容器、棉花均经过消毒处理，达到无菌状态；所述蒙上黑布置于室温条件下保湿培养过程是置于20℃±2℃，湿度90％以上，黑暗的条件下保湿培养24～36h。
10.根据权利要求7～9中任意一项所述的葡萄霜霉病菌离体保存方法，其特征在于：所述保存时间不超过120天；且最佳保存时间不超过90天。
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