[发明专利]一种女金丸是否含有白薇伪品老瓜头的鉴别方法

权利要求书

1.一种女金丸是否含有白薇伪品老瓜头的鉴别方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）待检样品制备：取女金丸，加入硅藻土，研细，加甲醇超声溶解，滤过，蒸至近干，残渣加水溶解，滤过，滤液通过D101型大孔树脂柱，以水洗脱，弃去洗脱液，继用甲醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解，滤过，取续滤液，即得待检样品；

（2）对照品制备：取老瓜头粉末使用甲醇超声提取，过滤，蒸干，残渣加甲醇溶解，二次过滤，经半制备HPLC纯化，色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液，体积比30:70，收集保留时间为15.7～15.9分钟的洗脱液，干燥得对照品；

（3）将待检样品和对照品分别注入液相色谱仪进行检测，以对照品谱图进行定位，若待检样品谱图与对照品谱图未出现保留时间相同的色谱峰，则待检样品中不含有老瓜头；若待检样品谱图与对照品谱图出现保留时间相同的色谱峰，则待检样品中含有老瓜头；

色谱条件如下：

Kromasil C₁₈色谱柱4.6mm×250mm，5μm；柱温：30℃；以甲醇为流动相A，0.1%磷酸溶液为流动相B，0-10min，流动相A由20%递增为30%，流动相B由80%递减为70%，10-25min，流动相A为30%，流动相B 70%，流速为1.0ml/min；采用二极管阵列检测器；检测波长为325nm。

2.根据权利要求1所述的鉴别方法，其特征在于步骤（3）中若待检样品谱图与对照品谱图出现保留时间相同的色谱峰，比较相应色谱峰在200~400nm波长范围的紫外-可见吸收光谱进行验证，吸收光谱相同时，则待检样品中含有老瓜头。

3.根据权利要求1或2所述的鉴别方法，其特征在于

步骤（1）中滤液通过D101型大孔树脂柱，D101型大孔树脂柱各项参数为16～60目，内径为1.5cm，柱高为15cm，流速1.0～1.5ml/min。

4.根据权利要求3所述的鉴别方法，其特征在于待检样品制备：

取女金丸40g，加硅藻土20g，研细，称取30g，蜜丸加甲醇100ml或水蜜丸加甲醇150ml，超声30min，滤过，蒸至近干，残渣加水10ml使溶解，用脱脂棉滤过，滤液通过D101型大孔树脂柱，16～60目，内径为1.5cm，柱高为15cm，流速1.0～1.5ml/min，以水 50ml洗脱，弃去洗脱液，继用甲醇80ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，滤过，取续滤液，即得。

5.根据权利要求3所述的鉴别方法，其特征在于步骤（2）中二次过滤为使用0.45μm微孔滤膜过滤。

6.根据权利要求3所述的鉴别方法，其特征在于设置对照品贮备液，浓度为0.1003 mg/ml，对照品溶液浓度为40.12 μg/mL。

7.根据权利要求3所述的鉴别方法，其特征在于步骤（2）中收集洗脱液是在将所有的洗脱液在325nm检测后，确定收集保留时间为15.7～15.9分钟的洗脱液。