[发明专利]一种低温α-淀粉酶Tcamy及其基因和应用

说明书

本发明涉及农业生物技术领域，具体涉及一种来源于真菌的低温α‑淀粉酶Tcamy及其基因和应用。其氨基酸序列如SEQ ID NO.1或2所示。该淀粉酶Tcamy最适pH为5.0，在pH5.0‑pH10.0范围内，该酶能够维持其50％以上的酶活力，这说明此酶具有很好的pH稳定性。其最适温度35℃，在0℃下保持有27％的活性；当热处理温度超过其最适温度之后，酶活骤降,为典型的低温α‑淀粉酶。

技术领域

本发明涉及农业生物技术领域，具体涉及一种低温α-淀粉酶Tcamy及其基因和应用。

背景技术

淀粉酶是一种用途极为广泛的生物催化剂，可应用于面包制作业、淀粉的糖化和液化、纺织品脱浆、造纸、清洁剂工业、化学、临床医学的分析和制药业等。淀粉酶家族包括α-淀粉酶、β-淀粉酶和葡萄糖淀粉酶。α-淀粉酶为内切酶，以无规则的方式切开淀粉分子内部的α-1，4糖苷键，而使淀粉生成糊精和低聚糖，是一种钙离子依赖性酶。

α-淀粉酶(EC.3.2.1.1)属于糖苷水解酶13家族，能够作用于可溶性淀粉、糖元、直链淀粉等α-1,4-葡聚糖，其水解淀粉的主要产物是一些由葡萄糖单位组成的低聚糖和糊精的混合物。根据淀粉酶催化活性的最适作用温度不同，可将淀粉酶分为低温、中温和高温淀粉酶。低温淀粉酶在生物技术和工业应用中具有广泛的吸引力，低温淀粉酶在低温和中温下具有较高的催化活性，它意味着在工业生产过程有着中更少的能量消耗。在烘焙行业中，α-淀粉酶被用来改善面包的柔软性和体积，在此之后需要酶完全失活，这可以用热不稳定的低温淀粉酶来完成而不影响产品品质。作为洗涤剂的添加剂而言，低温淀粉酶不仅能在低水温环境中高效发挥作用，而且排放后对环境危害小。另外，应用低温淀粉酶来进行废水处理和生物修复也是未来的研究热点。

本发明从Thermoascus crustaceus JCM12803菌株中得到了一个新的低温α-淀粉酶基因Tcamy，其编码的低温α-淀粉酶具有以下几个优点：低温下催化活性高、广泛的pH稳定性。所有这些优点都意味着新发明的低温淀粉酶在饲料、食品、医药等行业中，将会比之前报道的淀粉酶更有应用价值。

发明内容

本发明的目的是提供一种能高效应用的低温α-淀粉酶。

本发明的再一目的是提供编码上述低温α-淀粉酶的基因。

本发明的另一目的是提供包含上述基因的重组载体。

本发明的另一目的是提供包含上述基因的重组菌株。

本发明的另一目的是提供一种制备上述低温α-淀粉酶的基因工程方法。

本发明从Thermoascus crustaceus JCM12803中分离得到一种低温α-淀粉酶Tcamy，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。