[发明专利]调控C4B基因表达的非编码RNA及其用途

说明书

本发明涉及调控C4B基因表达的非编码RNA及其用途，更具体的涉及非编码RNA—ENSG00000233627、miR‑1197、miR‑1269a、miR‑182‑5p及其在诊治骨肉瘤转移中的应用。发明人对骨肉瘤转移患者、原发患者及正常人群，从mRNA到miRNA到lncRNA进行多维度研究，提供与骨肉瘤转移密切相关的C4B基因、调控C4B基因表达的lncRNA和miRNA，为骨肉瘤机制研究提供很好的思路，为骨肉瘤临床诊断提供新的分子标志物，具有重要的意义。

技术领域

本发明涉及分子生物学领域，具体的涉及调控C4B基因表达的非编码RNA及其用途，更具体的涉及非编码RNA—ENSG00000233627、miR-1197、miR-1269a、miR-182-5p及其在诊治骨肉瘤转移中的应用。

背景技术

C4B基因位于第六号染色体短臂，现有的研究显示其与食管鳞癌转移相关(Clinical significance of mannose-binding lectin-associated serine protease-2expression in esophageal squamous cell carcinoma，Int.J.Cancer:118,2930-2935(2006))。人类基因绝大部分可发生转录，但产物大多数为非编码RNA(ncRNA)，部分ncRNA可通过影响基因及表观遗传学对生命活动起调节作用，长链非编码RNA(lncRNA)与微小RNA(miRNA)是其中最重要的两类，它们在多种生命活动中扮演重要角色。

lncRNA为一类转录本长度大于200nt，缺少有效开放性阅读框，不编码蛋白质的RNA分子。其受RNA聚合酶Ⅱ催化转录合成，主要分布于细胞核，少量存在于细胞浆中。研究发现，lncRNA多倾向于折叠成热力学稳定的二级或更高级结构行使功能，部分lncRNA经过剪接成为具有类似于mRNA的polyA尾与启动子结构，且其可在组织器官分化过程中动态的表达与不同的剪接方式，因此lncRNA具有时间及空间特异性。目前lncRNA按转录位置的不同可分为5类:位于基因间区的lncRNA；天然反义链lncRNA；内含子区lncRNA；正义链lncRNA；双向lncRNA。miRNA是一类不具有开放性阅读框架、长度为18-25nt的非编码短序列RNA，其广泛存在于真核生物中。成熟的miRNA 5'端有一磷酸基团3'端为羟基，这一特点使它与大多数寡核苷酸和功能RNA的降解片段区别开来.绝大多数miRNA具有高度的保守性、时序性和组织特性。

很多研究表明miRNA是lncRNA发挥作用的一个重要环节，在很多疾病的病变细胞中发现某一lncRNA与某些miRNA存在一定的数量关系，且它们的数量变化与相关疾病的发生发展密切相关(Functional interactions among microRNAs and long noncodingRNAs,Semin Cell Dev Biol，2014，34:9-14)。lncRNA与miRNA都有各自的调控网络，但是两者的调控网络并不是独立存在的，很多时候在一种疾病的发生发展中lncRNA与miRNA的调控是相互依存、相互交织的，共同形成了一个复杂的调控网络。

申请人之前曾采用高通量测序研究转移性骨肉瘤患者及健康人的miRNA的表达数据，发现miR-4520-3p、miR-1299和骨肉瘤转移相关(ZL2016100688631和ZL2016100686566)，本申请中，发明人进一步对骨肉瘤转移患者、原发患者及正常人群，从mRNA到miRNA到lncRNA进行多维度研究。本发明提供与骨肉瘤转移密切相关的C4B基因、调控C4B基因表达的lncRNA和miRNA，为骨肉瘤机制研究提供很好的思路，为骨肉瘤临床诊断提供新的分子标志物，具有重要的意义。

发明内容

本发明的目的在于提供检测C4B基因及调控其表达的非编码RNA制剂在制备诊断骨肉瘤转移试剂中的应用，所述非编码RNA为lncRNA和/或miRNA。

进一步，lncRNA为ENSG00000233627；miRNA为miR-1197、miR-1269a或miR-182-5p。