[发明专利]一种纯化抗CD20人鼠嵌合单克隆抗体的方法

权利要求书

1.一种离子交换层析纯化抗CD20的人鼠嵌合单克隆抗体的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

（1）将亲和层析获得的样品100mL，加入添加剂，调节pH5.0~6.0待用；

阳离子层析：

（2）平衡：用pH5.0~6.0，电导5.0~7.0mS/cm，含添加剂浓度为0.02~0.05mol/L的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠平衡缓冲液，对阳离子层析柱进行平衡5CV，流速为200cm/h；

（3）上样：将上述样品进行上样，流速为200cm/h；

（4）洗涤：用平衡缓冲液复平衡3CV，流速为200cm/h；再用pH5.0~6.0，电导6.0~7.0mS/cm，添加剂浓度为0.02~0.05mol/L的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠洗涤缓冲液对阳离子层析柱进行洗涤6CV，流速为200cm/h；然后再用平衡缓冲液复平衡3CV，流速为200cm/h；

（5）洗脱：用pH6.0~6.5，电导6.5~8.5mS/cm，添加剂浓度为0.02~0.05mol/L的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠洗脱缓冲液对阳离子层析柱进行洗脱，流速为200cm/h，出峰收集流出液记为CEX Pro；

阴离子层析：

（6）平衡：利用步骤（5）洗脱缓冲液平衡阴离子层析柱5CV，流速为300cm/h；

（7）上样：利用步骤（5）所得样品上样，流速为300cm/h，出峰收集流出液；

（8）洗涤：利用步骤（5）洗脱缓冲液继续洗涤阴离子层析柱，流速为300cm/h，持续收集流出液至基线平稳，收集的流出液记为AEX Pro；

所述的添加剂为精氨酸，甘氨酸或甘露醇中的一种或几种；添加剂的加入量为每升样品中加入0.02~0.05mol添加剂。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，调节电导使用盐选自氯化钠，氯化钾，氯化铵中的一种。