[发明专利]多肽的制备方法

权利要求书

1.一种裂解液，其为TFA、茴香硫醚、水、EDT、TIS和苯酚的混合物，其中TFA、茴香硫醚、水、EDT、TIS和苯酚之间的用量比为：14～18mL TFA:0.8～1.2mL茴香硫醚:0.8～1.2mL水:0.3～0.7mL EDT:0.1～0.3mL TIS:0.8～1.2g苯酚。

2.权利要求1所述的裂解液，其中TFA、茴香硫醚、水、EDT、TIS和苯酚之间的用量比为：16.3mL TFA:1mL茴香硫醚:1mL水:0.5mL EDT:0.2mL TIS:1g苯酚。

3.一种制备SEQ ID NO.1所示多肽或其药学上可接受的盐的方法，

其中：C末端的半胱氨酸(C)羧基为酰胺化结构，N末端的赖氨酸(K)氨基为乙酰化结构，在氨基酸序列位置30和38的两个Cys(C)残基之间形成分子内二硫键，

包括以下步骤：

1)在固相载体上合成全保护的肽序列，得到肽树脂；

2)用裂解液裂解肽树脂，得到粗肽；

3)采用碘氧化法对粗肽直接进行二硫键环化反应，在氨基酸序列位置30和38的两个Cys(C)残基之间形成形成分子内二硫键，

所述裂解液为权利要求1或2所述的裂解液，其中在步骤3)中对所述粗肽进行以下操作：

使用乙腈和醋酸的混合溶剂溶解粗肽，得到粗肽溶液；

向粗肽溶液中加入水，得到稀释液；

搅拌中向稀释液中逐滴加入碘甲醇溶液，所述混合溶剂中，乙腈和醋酸的体积比为0.5～1.5:1，

所述粗肽与混合溶剂的质量/体积比为0.5～1.5g/100mL，

向粗肽溶液中加入水的量为所述混合溶剂体积的0.8～1.2倍，

所述碘甲醇溶液的浓度为每100mL甲醇中含有0.5g～2.5g碘，

裂解液的用量为1g肽树脂加8～20mL裂解液。

4.权利要求3所述的制备方法，其中所述混合溶剂中，乙腈和醋酸的体积比为0.8～1.2:1。

5.权利要求4所述的制备方法，其中所述混合溶剂中，乙腈和醋酸的体积比为0.9～1.1:1。

6.权利要求5所述的制备方法，其中所述混合溶剂中，乙腈和醋酸的体积比为1:1。

7.权利要求3所述的制备方法，其中所述粗肽与混合溶剂的质量/体积比为0.8～1.2g/100mL。

8.权利要求7所述的制备方法，其中所述粗肽与混合溶剂的质量/体积比为0.9～1.1g/100mL。

9.权利要求8所述的制备方法，其中所述粗肽与混合溶剂的质量/体积比为1g/100mL。

10.权利要求3所述的制备方法，其中向粗肽溶液中加入水的量与所述混合溶剂体积相同。

11.权利要求3所述的制备方法，其中所述碘甲醇溶液的浓度为每100mL甲醇中含有1g～2g碘。

12.权利要求11所述的制备方法，其中所述碘甲醇溶液的浓度为每100mL甲醇中含有1.2g碘或1.5g碘。

13.权利要求3所述的制备方法，其中，裂解液的用量为1g肽树脂加8～15mL裂解液。

14.权利要求13所述的制备方法，其中，裂解液的用量为1g肽树脂加10mL裂解液。

15.权利要求3所述的制备方法，其中所述固相载体为Rink酰胺树脂，Rink Amide AM树脂或Rink Amide MBHA树脂。

16.权利要求15所述的制备方法，其中所述固相载体为Rink Amide AM树脂。