[发明专利]PTH融合蛋白、其制备方法、含有其的检测试剂、试剂盒及应用

权利要求书

1.一种PTH检测试剂，其特征在于，所述检测试剂包含PTH融合蛋白，所述PTH融合蛋白由标签序列以及PTH 1-84位全长氨基酸序列组成，

其中，所述标签序列位于所述PTH 1-84位全长氨基酸序列的C-末端或N-末端，且所述标签序列选自如下任意一种：MBP、NusA、TF、MysB、GST、T7、6*His+T7、TrxA、DsbC、DsbA、IF2、Sumo、3*fLag、Avi、KSI、CKS、SKP、BFR、GrPE、btuF及Ecotin；

所述检测试剂为定标品或质控品，所述检测试剂还包括稳定所述融合蛋白的稳定液，所述稳定液包括：

基础组分，所述基础组分包括pH7.2～7.5的磷酸缓冲液；以及

稳定组分，所述稳定组分包括动物血清、糖类、渗透剂及洗涤剂中的至少两种。

2.根据权利要求1所述的检测试剂，其特征在于，所述PTH融合蛋白由DNA分子编码，所述DNA分子还包括分别位于所述PTH融合蛋白的DNA序列5’端的连接序列和3’端的连接序列，所述5′端的连接序列为5′端酶切位点，所述3′端的连接序列为依次连接的终止密码子和3′端酶切位点。

3.根据权利要求2所述的检测试剂，其特征在于，所述5′端酶切位点为BamHI酶切位点，所述3′端酶切位点为XhoI酶切位点，所述终止密码子为TAA。

4.根据权利要求2所述的检测试剂，其特征在于，所述DNA分子被有效连接在重组质粒上。

5.根据权利要求4所述的检测试剂，其特征在于，所述重组质粒选自如下任意一种：

pET-SKP、pET-28a、pET-MBP、pET-NusA、pET-TF、pET-MysB、pET-GST、pET-21a、pET-TrXA、pET-DsbC、pET-DsbA、pET-IF2、pET-Sumo、pET-3*fLag、pET-Avi、pET-KSI、pET-CKS、pET-BFR、pET-GrPE、pET-btuF及pET-Ecotin。

6.根据权利要求5所述的检测试剂，其特征在于，所述PTH融合蛋白通过将所述重组质粒转化并诱导宿主细胞表达得到。

7.根据权利要求1所述的检测试剂，其特征在于，所述动物血清选自山羊血清、牛血清及马血清中的至少一种，所述糖类选自蔗糖、海藻糖、低聚果糖及葡聚糖中的至少一种，所述渗透剂选自甘氨酸、精氨酸及脯氨酸中的至少一种，所述洗涤剂为胆酸、脱氧胆酸、十二烷基硫酸钠、吐温20以及吐温80中的至少一种。

8.根据权利要求1所述的检测试剂，其特征在于，

所述基础组分包括：20～100mM的磷酸缓冲液、50～100mM NaCl、0.01～1％的螯合剂以及0.01～1％的防腐剂，其中，所述螯合剂为EDTA或EGTA，所述防腐剂为NaN₃或ProClin300。

9.根据权利要求1所述的检测试剂，其特征在于，所述稳定组分包括1～20wt％的胎牛血清、0.1～2M的甘氨酸、0.01～0.2wt％的吐温以及0.5～8wt％的蔗糖或海藻糖。

10.根据权利要求9所述的检测试剂，其特征在于，

所述稳定组分包括2～10wt％的胎牛血清、0.2～1M的甘氨酸、0.01～0.1wt％的吐温以及1～5wt％的蔗糖或海藻糖。

11.一种PTH检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1至10中任一项所述的PTH检测试剂。

12.权利要求1至10中任一项所述的PTH检测试剂在制备PTH抗原临床检测试剂盒中的应用。

13.根据权利要求12所述的应用，其特征在于，所述应用包括：将所述PTH检测融合蛋白作为定标品或质控品，通过半自动免疫分析仪或全自动免疫分析仪对PTH抗原进行临床检测。