[发明专利]一种基因多态性变异位点早期诊断子宫内膜癌的试剂盒

说明书

本发明公开了一种基因多态性变异位点早期诊断子宫内膜癌的试剂盒，包括使用两个单核苷酸多态性位点基因型的特异性引物、一个DNA测序引物和一个内切酶，针对的检测基因为两个雌激素代谢相关基因：分别为UGT1A8基因和UGT2B7基因；特异性引物是指针UGT1A8rs1042597、UGT2B7rs7439366，两个单核苷酸多态性位点，能特异性扩增出包含这两个SNPs位点的DNA片段的引物对。与现有技术对子宫内膜癌进行发病风险多用单个SNP位点进行分析，存在实用性、敏感性和特异性较差的情况相比本发明所用的检测位点都与子宫内膜癌易感性相关，选择的位点具有代表性，通过检测，能够有效预测子宫内膜癌的发病风险，能够较好的用于实际的检测和应用。

技术领域

本发明涉及一种试剂盒，具体涉及一种基因多态性变异位点早期诊断子宫内膜癌的试剂盒。

背景技术

子宫内膜癌是中老年女性生殖道常见的恶性肿瘤之一，发病率占全身生殖道恶性肿瘤的20-30%，近年随着环境和人口老龄化的影响，子宫内膜癌癌的发病率有明显增高的趋势。 发病率已经接近宫颈癌的发生率。

基因多态性（single nucleotide polymorphism, SNP） 普遍存在于机体 DNA 序列中，是第三代遗传标记。SNP研究是人类基因组计划走向应用的重要步骤，可以用于高危群体的发现、疾病相关基因的鉴定、药物的设计和测试以及生物学的基础研究等。通过病例对照研究不仅对于发现癌症相关基因及阐明其作用机制起着重要作用，而且对于癌症易感性早期风险诊断和个体化医疗具有重要意义。

与子宫内膜癌的发病相关的基因众多，其多态性位点变异可影响子宫内膜癌的发病风险，因此建立迅速快捷的子宫内膜癌遗传易感性的无创检测方法，能够检测出子宫内膜癌发生相关的基因单核苷酸位点基因型，早期筛查出子宫内膜癌易感高危人群，从而根据检测结果尽早采取预防措施，这对于提高子宫内膜癌的早期诊断具有重要的意义。

发明内容

本发明提供一种基因多态性变异位点早期诊断子宫内膜癌的试剂盒，用以解决上述现有技术存在的问题。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是：包括使用两个单核苷酸多态性位点基因型的特异性引物、一个DNA测序引物和一个内切酶，针对的检测基因为两个雌激素代谢相关基因：分别为UGT1A8基因和UGT2B7基因。

进一步的，所述的特异性引物是指针UGT1A8rs1042597、UGT2B7rs7439366，两个单核苷酸多态性位点，能特异性扩增出包含这两个SNPs位点的DNA片段的引物对。

进一步的，所述的DNA测序引物是针对UGT1A8rs1042597这一个单核苷酸多态性位点而设计，能通过DNA测序技术特异性检测出上述一个SNPs位点基因型的DNA测序引物。

进一步的，所述的内切酶是针对UGT2B7rs7439366这一个单核苷酸多态性位点而设计，能通过琼脂糖凝胶电泳检测出上述一个SNPs位点基因型的 DNA 测序引物。

进一步的，所述的两对特异性引物序列如下 ：

（1）UGT1A8rs1042597正向引物：5'-CAGTTCTCTCATGGCTCGCA-3；

反向引物5'-GTGTGGCTGTAGAGATCATATGCT-3'；

（2）UGT2B7rs7439366正向引物：5'-ACCTTTTTTTTTTCTATTCCTGT-3'；

反向引物5'-CAAAATAAAACCAACAAAAGTATG-3'。

进一步的，所述的UGT1A8rs1014597的一对DNA测序引物序列为：

正向引物：5'-CAGTTCTCTCATGGCTCGCA-3；