[发明专利]鲤鱼鱼卵磷脂的制备方法

说明书

本发明公开了鲤鱼鱼卵磷脂的制备方法，包括酶解、卵磷脂粗品的制备以及柱层析纯化。有益效果为：本发明所公布的制备方法简单，条件温和，卵磷脂的提取率高，纯度和溶解度大，粘度小，改变了其流变性质，方便了对其进行加工制造，且过程中没有有害物质的混入，对人体的健康没有任何不良影响，属于健康绿色生产工艺；巯基蛋白酶的活性高，酶解反应速度快，且巯基蛋白酶与底物结合的机率高，使蛋白酶能够有效破坏鱼卵中卵磷脂与蛋白质之间的氢键，使卵磷脂能够被充分提取，使鱼卵资源得到了充分利用。

技术领域

本发明属于生物工程领域，尤其是涉及鲤鱼鱼卵磷脂的制备方法。

背景技术

卵磷脂是一种在动植物中分布很广的含磷脂类，它的主要成分有磷脂酰胆碱、脑磷脂、肌醇磷脂和磷脂酸。卵磷脂有极高的营养和医学价值，具有延缓衰老、提高大脑活力、防治动脉硬化、解除心血管疾病、预防脂肪肝、滋润皮肤等多种生理功能，同时还具有很好的乳化作用和抗氧化性能。因此，卵磷脂在食品、医药、化妆品等行业应用广泛。

发明内容

本发明的目的是提供鲤鱼鱼卵磷脂的制备方法，其制备方法简单，条件温和，所制备的卵磷脂提取率高，纯度和溶解度大，粘度小，改变了其流变性质，方便了对其进行加工制造。

为了达到上述目的本发明提供的技术方案为：鲤鱼鱼卵磷脂的制备方法，其制备方法包括以下步骤：

酶解：取鲤鱼鱼卵与蒸馏水混合，匀浆，加入巯基蛋白酶反应，得酶解液；

卵磷脂粗品的制备：向酶解液中加入质量分数为93％-94％的乙醇搅拌提取，所得提取液经浓缩干燥得卵磷脂粗品；

柱层析纯化：以硅胶为固定相，使卵磷脂粗品用异丙醇溶解，上样，采用异丙醇洗脱，洗脱液用TLC板定性分析，使卵磷脂馏分经浓缩干燥得卵磷脂。该制备方法简单，条件温和，卵磷脂的提取率高，纯度和溶解度大，粘度小，改变了其流变性质，方便了对其进行加工制造，且过程中没有有害物质的混入，对人体的健康没有任何不良影响，属于健康绿色生产工艺。

作为优选，鲤鱼鱼卵与蒸馏水的料液比为1g:3-4mL。该料液比提供了恰当的浓度梯度，为酶解过程中的物质传递提供了充足的动力，且该条件下水分消耗较少，节约了资源，具有良好的环境保护效益。

作为优选，巯基蛋白酶的加入量占鱼卵质量的3％-5％，反应温度为46-48℃，反应时间为18-20min。该条件下，巯基蛋白酶的活性高，酶解反应速度快，且巯基蛋白酶与底物结合的机率高，使蛋白酶能够有效破坏鱼卵中卵磷脂与蛋白质之间的氢键，使卵磷脂能够被充分提取，使鱼卵资源得到了充分利用。

作为优选，酶解液与乙醇的体积比为1:1.5-2.1。采用单一溶剂提取卵磷脂，避免了其它杂质混入提取液，且浓缩提取液所得的溶剂可以用来当下一批卵磷脂提取的溶剂，从而减少了溶剂用量。

作为优选，异丙醇的洗脱速度为2.5-3.5mL/min。该速度在保证卵磷脂的提取率的情况下使纯化所用的时间最少，从而提高了工艺的经济价值。

作为优选，硅胶的颗粒度为400-500目。该条件下，硅胶在柱子中容易压紧，提高了作为固定相的硅胶与流动相的接触面积，增强了柱子的分离效果，使所得的卵磷脂纯度更高。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：本发明所公布的制备方法简单，条件温和，卵磷脂的提取率高，纯度和溶解度大，粘度小，改变了其流变性质，方便了对其进行加工制造，且过程中没有有害物质的混入，对人体的健康没有任何不良影响，属于健康绿色生产工艺；巯基蛋白酶的活性高，酶解反应速度快，且巯基蛋白酶与底物结合的机率高，使蛋白酶能够有效破坏鱼卵中卵磷脂与蛋白质之间的氢键，使卵磷脂能够被充分提取，使鱼卵资源得到了充分利用。

具体实施方式

以下通过实施例进一步详细描述：