[发明专利]一种猪繁殖与呼吸综合征病毒纯化方法

权利要求书

1.一种猪繁殖与呼吸综合征病毒纯化方法，其特征在于使用PEG6000沉淀法与透析袋，并包括以下步骤：

1)将在Marc-145细胞中培养的病毒冻融三次，使细胞裂解，将病毒释放入培养液中；

2)将该病毒液初步离心，除去细胞碎片及部分杂质，获得初级纯化病毒液；

3)以1∶1的比例将PEG6000/NaCl混合液加入到步骤2)的初级纯化病毒液中，使用混合仪混匀震荡一定时间；

4)将步骤3)混匀后的病毒液放入低温离心机中离心，离心后弃上清，沉淀加入无菌0.1M的PBS，震荡重悬；

5)将步骤4)中的病毒重悬液再次放入冷冻离心机，离心除去沉淀，取上清，获得二级纯化病毒液；

6)将步骤5)中的二级纯化病毒液滴加入透析袋，将透析袋放置于透析液中，用磁力搅拌器透析一定时间，每隔两个小时换一次透析液，最终获得病毒纯化液成品。

2.根据权利要求1所述的一种猪繁殖与呼吸综合征病毒纯化方法，其特征在于步骤1)所述的病毒需放置于冻存盒在-80℃环境中冻存，融解温度为室温。

3.根据权利要求1所述的一种猪繁殖与呼吸综合征病毒纯化方法，其特征在于步骤2)所述的离心力为10000g，离心时间为30min 。

4.根据权利要求1所述的一种猪繁殖与呼吸综合征病毒纯化方法，

其特征在于步骤3)所述的PEG6000/NaCl混合液浓度分别为14％和6％。

5.根据权利要求1所述的一种猪繁殖与呼吸综合症病毒纯化方法，

其特征在于步骤4)所述的低温离心机温度为4℃，离心力为10000g，时间为30min。

6.根据权利要求1所述的一种猪繁殖与呼吸综合症病毒纯化方法，其特征在于步骤5)所述的离心温度为4℃，离心力为8000g，时间为15min 。

7.根据权利要求1所述的一种猪繁殖与呼吸综合征病毒纯化方法，其特征在于步骤6)的透析袋规格为100kd，透析液为0.1MPBS。