[发明专利]从鱿鱼缠卵腺中提取的抗氧化活性多肽在审
申请号: | 201810041254.6 | 申请日: | 2018-01-16 |
公开(公告)号: | CN108103133A | 公开(公告)日: | 2018-06-01 |
发明(设计)人: | 张海玲 | 申请(专利权)人: | 舟山昌国海洋科技有限公司 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/18;C07K1/20 |
代理公司: | 北京华识知识产权代理有限公司 11530 | 代理人: | 赵永强 |
地址: | 316000 浙江省舟山市定海区干览镇商会路*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 抗氧化活性 多肽 酶解液 鱿鱼 超滤 鱼腥味 反相高效液相色谱 离子交换树脂层 预处理 超声波浸泡 碱性蛋白酶 凝胶柱层析 异丙醇溶液 中性蛋白酶 热稳定性 脱脂 超滤膜 甘氨酸 缓冲液 保健食品 分级 沥干 水解 洗净 添加剂 浸泡 | ||
1.从鱿鱼缠卵腺中提取的抗氧化活性多肽,其特征在于:所述的抗氧化活性多肽的分子量为1650-2280kDa。
2.根据权利要求1所述的从鱿鱼缠卵腺中提取的抗氧化活性多肽,其特征在于:所述的抗氧化活性多肽的制备为:
步骤1:将鱿鱼缠卵腺清水洗净,沥干,切碎后再组织捣碎,按料液比为1:7-9加入浓度为0.8-1.3‰的NaOH水溶液中,在超声波功率为150-200W、温度为2-5℃下超声波浸泡2-4h,水洗至中性,最后按料液比为1:20-24向鱿鱼缠卵中加入浓度为8-12%的异丙醇溶液,在温度为2-5℃浸泡脱脂10-15h,用蒸馏水洗净沥干,备用;
步骤2:按料液比1:20-25(w/v)向匀浆缠卵腺中加入pH为9.5-10.5的甘氨酸-NaOH缓冲液,混合均匀,然后在45-50℃水浴中预热10-15min,再按匀浆缠卵腺重量的1.0-1.5%加入碱性蛋白酶,在45-55℃下酶解50-60min,灭酶,调整pH至中性,离心,然后将上清液的pH至6.0-7.5,按原料重量的1.0-1.5%加入中性蛋白酶,在45-50℃下酶解3-6h后灭酶,得酶解液,备用;
步骤3:将酶解液经截留分子量为3kDa和10kDa的超滤膜进行分级,收集截留分子量小于3kDa组分,得到超滤酶解液,然后将超滤酶解液依次经凝胶柱层析、离子交换树脂层析和反相高效液相色谱纯化,即得抗氧化活性多肽。
3.根据权利要求2所述的从鱿鱼缠卵腺中提取的抗氧化活性多肽的制备方法,其特征在于:所述的步骤1中NaOH水溶液中含有0.4-0.6%微波改性活性炭。
4.根据权利要求3所述的从鱿鱼缠卵腺中提取的抗氧化活性多肽的制备方法,其特征在于:所述的步骤1中微波改性活性炭的制备方法为:将活性炭置于浓度为3-6%的盐酸溶液中煮沸,并保持40-50min,滤去水分后用去离子水反复冲洗至中性,接着在100-120℃下烘干20-30h,然后将活性炭微波辐射,即得改性活性炭。
5.根据权利要求4所述的从鱿鱼缠卵腺中提取的抗氧化活性多肽的制备方法,其特征在于:所述的盐酸溶液中含有0.021-0.025%的马兜铃酸。
6.根据权利要求4所述的从鱿鱼缠卵腺中提取的抗氧化活性多肽的制备方法,其特征在于:所述的微波辐射功率为600-700W,时间为4-6min。
7.根据权利要求2所述的从鱿鱼缠卵腺中提取的抗氧化活性多肽的制备方法,其特征在于:所述的步骤2中中性蛋白酶酶解时再加入中性蛋白酶重量0.25-0.30%的聚六亚甲基胍。
8.根据权利要求1所述的从鱿鱼缠卵腺中提取的抗氧化活性多肽,其特征在于:所述的抗氧化活性多肽可以作为药品、保健食品和食品的添加剂。
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