[发明专利]用于突变ROSA26基因的系统及其应用

权利要求书

1.用于突变ROSA26基因的CRISPR/Cas9系统，包括靶向ROSA26基因的sgRNA，所述sgRNA的靶序列为如下A1)、A2)或A3)：

A1)序列表中序列2的核苷酸序列；

A2)与A1)限定的DNA序列具有75％或75％以上同一性的由A1)衍生的DNA序列；

A3)在严格条件下与A1)限定的DNA序列杂交的由A1)衍生的DNA序列。

2.根据权利要求1所述的系统，其特征在于：所述系统还包括Cas9。

3.根据权利要求1或2所述的系统，其特征在于：所述系统还包括供体DNA，所述供体DNA含有ROSA26基因中位于所述靶序列上下游的两个DNA片段。

4.根据权利要求3所述的系统，其特征在于：所述供体DNA还含有Sfat1编码基因或Sfat1编码基因的表达盒。

5.用于突变ROSA26基因的CRISPR/Cas9系统，包括与权利要求1中所述sgRNA相关的生物材料，所述生物材料为如下B1)-B8)中的任一种：

B1)编码权利要求1中所述sgRNA的核酸分子；

B2)含有B1)所述核酸分子的表达盒；

B3)含有B1)所述核酸分子的重组载体；

B4)含有B2)所述表达盒的重组载体；

B5)含有B1)所述核酸分子的细胞系；

B6)含有B2)所述表达盒的细胞系；

B7)含有B3)所述重组载体的细胞系；

B8)含有B4)所述重组载体的细胞系。

6.根据权利要求5所述的系统，其特征在于：所述系统还包括与Cas9相关的生物材料，所述生物材料为如下C1)-C8)中的任一种：

C1)编码Cas9的核酸分子；

C2)含有C1)所述核酸分子的表达盒；

C3)含有C1)所述核酸分子的重组载体；

C4)含有C2)所述表达盒的重组载体；

C5)含有C1)所述核酸分子的细胞系；

C6)含有C2)所述表达盒的细胞系；

C7)含有C3)所述重组载体的细胞系；

C8)含有C4)所述重组载体的细胞系。

7.根据权利要求5或6所述系统，其特征在于：所述系统还包括权利要求3或4中所述供体DNA。

8.权利要求1-7中任一所述系统或权利要求1中所述sgRNA的靶序列的下述任一应用：

Y1)在突变ROSA26基因中的应用；

Y2)在制备ROSA26基因突变动物细胞中的应用；

Y3)在制备ROSA26基因突变动物中的应用；

Y4)在制备表达Sfat1动物细胞中的应用；

Y5)在制备表达Sfat1动物中的应用；

Y6)在制备富含不饱和脂肪酸动物中的应用；

Y7)在动物育种中的应用。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：所述动物为哺乳动物。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述哺乳动物为猪。