[发明专利]一种流感病毒亚单位疫苗纯化方法及其应用

权利要求书

1.一种制备流感病毒亚单位疫苗的方法，所述方法的步骤包括：(1)病毒的增殖、浓缩；(2)病毒裂解前纯化；(3)病毒的裂解；(4)裂解液的纯化；(5)裂解液的灭活；(6)灭活液的洗滤纯化，其特征在于，所述的步骤(2)病毒裂解前纯化所用方法为密度梯度离心法，

所述的步骤(3)病毒的裂解为病毒裂解与蔗糖密度梯度离心同时进行。

2.根据权利要求1所述的一种制备流感病毒亚单位疫苗的方法，其特征在于，所述的步骤(2)病毒裂解前纯化中包括：1)制作蔗糖密度梯度；2)上样与离心；3)加入液体进行循环；4)收集目标液。

3.根据权利要求1所述的一种制备流感病毒亚单位疫苗的方法，其特征在于，所述的步骤(3)病毒的裂解中包括：1)制作蔗糖密度梯度；2)上样与离心；3)加入液体进行循环；4)收集目标液。

4.根据权利要求1所述的一种制备流感病毒亚单位疫苗的方法，其特征在于，所述的步骤(4)裂解液的纯化中是以凝胶层析，离子交换层析，吸附层析以及亲和层析中的一种或者两种以上的方法进行纯化。

5.根据权利要求1所述的一种制备流感病毒亚单位疫苗的方法，其特征在于，所述的步骤(6)灭活液的洗滤纯化是对病毒灭活液进行洗滤去除杂质。

6.根据权利要求1所述的一种制备流感病毒亚单位疫苗的方法，其特征在于，所述的步骤(1)病毒的增殖、浓缩中包括：1)工作种子批毒种稀释；2)接种；3)培养；4)病毒收获；5)离心澄清合并；6)病毒合并液浓缩。

7.根据权利要求1所述的一种制备流感病毒亚单位疫苗的方法，其特征在于，所述的步骤(5)裂解液的灭活中，用甲醛，戊二醛，高锰酸钾，环氧乙烷，过氧乙酸，过氧化氢，二氧化氯，辛酸盐，β-丙内酯中的一种或两种以上对纯化得到的蛋白进行灭活。

8.根据权利要求1所述的一种制备流感病毒亚单位疫苗的方法，其特征在于，所述的制备流感病毒亚单位疫苗的方法还包括步骤(7)半成品配制。

9.一种流感病毒亚单位疫苗，所述的疫苗的制备方法为：(1)病毒的增殖、浓缩；(2)病毒裂解前纯化；(3)病毒的裂解；(4)裂解液的纯化；(5)裂解液的灭活；(6)灭活液的洗滤纯化，其特征在于，所述的疫苗是用于预防由甲型流感病毒，乙型流感病毒，丙型流感病毒引起的流感。

10.根据权利要求9所述的一种流感病毒亚单位疫苗，其特征在于，所述的流感由HANA流感病毒和/或B型流感病毒引起的流感，所述HA是指H1～H16，所述NA是指N1～N10，所述HANA是由H1～H16与N1～N10排列组合成的，所述B型流感病毒选自Victoria系和/或Yamagata系。