[发明专利]一株植物乳杆菌、该植物乳杆菌冻干粉及其制备方法

说明书

本申请提供一株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum LP4)，其微生物保藏编号为CGMCC No.14533。本申请还提供一种制备所述植物乳杆菌LP4冻干粉的方法及使用该方法制备的植物乳杆菌LP4冻干粉，所述方法在对所述植物乳杆菌LP4进行冻干前对所述植物乳杆菌LP4进行包被处理，组合使用多种保护剂，特别地，在对所述植物乳杆菌LP4表面进行首次包被后，再进行二次包被，从而弥补首次包被可能存在的包被不完全的缺陷，在所述植物乳杆菌LP4菌体表面形成至少完全的致密的保护层，并与所述菌体构成微囊结构，从而有效地将所述植物乳杆菌LP4菌体与外界环境隔离，并在微囊内部形成稳定地内环境，从而使得所述植物乳杆菌LP4在常温条件下也能够保持活力。

技术领域

本申请涉及生物技术领域，特别涉及一株植物乳杆菌、该植物乳杆菌冻干粉及其制备方法。

背景技术

相比于乳酸菌深冷制剂，乳酸菌冻干粉由于具有便于贮藏和使用等优点被广泛使用。乳酸菌冻干粉中菌体的活菌数、存活率、活力等稳定性指标对其能否正常使用具有重要影响。

通常，乳酸菌冻干的方法为将含有液相组分的乳酸菌菌体在低温环境下急速冷冻，再按照程序升温获得乳酸菌冻干粉，这种方法在冻干过程中，菌体细胞由于遭遇冷冻冲击会导致细胞壁通透性改变和代谢损伤，从而造成菌体失活。在贮存期间，乳酸菌冻干粉中乳酸菌菌体则会因为与环境中水、氧和自由基接触造成损伤，进一步造成菌体失活。由于冻干过程和贮藏期间的双重损失，从而导致在实际使用时乳酸菌冻干粉中活菌数量低，存活率低，菌体活力不足等问题。

现有技术有大量研究来减少在冻干过程中乳酸菌活菌的损失，相比于直接进行冻干的方法，通过这些方法制备的冻干粉中活菌数量有所提高，但是，这些方法并不能解决贮藏阶段活菌的损失，制得的乳酸菌冻干粉仍需低温保藏，通过使乳酸菌休眠的方法来保持乳酸菌的活性。而在没有低温保藏设备的条件下，乳酸菌冻干粉则被置于常温环境中，从而导致乳酸菌冻干粉中的活菌存活率会急剧下降，表现为乳酸菌冻干粉失效，进而影响其功效，这为乳酸菌冻干粉的使用带来了极大的不便。

发明内容

本申请的目的之一是提供一株植物乳杆菌，本申请的目的之二是提供一种将所述植物乳杆菌制备成冻干粉的方法，以解决现有冻干方法制得的乳酸菌冻干粉中活菌数量低及常温贮藏菌体易失活，货架期内无法有效保证活菌数的问题。

为达到上述目的，本申请通过以下技术方案来实现：

植物乳杆菌LP4(Lactobacillus plantarum LP4)通过以下方法筛选得到：

所述植物乳杆菌LP4(Lactobacillus plantarum LP4)是从传统泡菜中分离得到的潜在益生特性的益生菌；该菌株已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心，保藏号：CGMCC No.14533；分类命名为：植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum LP4)；保藏时间：2017年8月18日；保藏地址：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。

本申请所分离的植物乳杆菌LP4(Lactobacillus plantarum LP4)具有如下生物学特性：菌种为革兰氏阳性菌，呈直杆状，单个、有时成对或成链状。MRS固体培养基上菌落直径1-3mm，乳白色，凸起，呈圆形，表面光滑。最适生长温度为30～37℃，厌氧或兼性厌氧，最适pH＝6.5左右，在MRS液体培养基中生长浑浊。

本申请提供一种制备所述植物乳杆菌LP4(Lactobacillus plantarum LP4)冻干粉的方法，包括：

步骤1-1，将湿菌体与抗氧化剂混合，搅拌；

步骤1-2，将步骤1-1制得的体系与多元醇混合，搅拌；

步骤1-3，将步骤1-2制得的体系与碱性多糖或其水分散体系混合，搅拌；