[发明专利]使用热稳定丝氨酸蛋白酶的方法

权利要求书

1.一种用于生产热稳定丝氨酸蛋白酶的方法，所述方法包括：

(a)用编码与SEQ ID NO:3、8或10具有至少80％序列同一性的热稳定丝氨酸蛋白酶的重组构建体转化生产宿主；以及

(b)在37.5℃以上的温度下培养步骤(a)的生产宿主，以提高所述热稳定丝氨酸蛋白酶的表达水平。

2.根据权利要求1所述的方法，其中任选地从所述生产宿主回收所述热稳定丝氨酸蛋白酶。

3.一种含有热稳定丝氨酸蛋白酶的培养物上清液，所述培养物上清液通过权利要求1或2所述的方法获得。

4.一种饲料、喂养料、饲料添加剂组合物、预混物、食物或谷物产品，其包含与SEQ IDNO:3、8或10具有至少80％序列同一性的热稳定丝氨酸蛋白酶，其中所述热稳定丝氨酸蛋白酶可以单独使用或与至少一种直接饲喂微生物组合使用。

5.一种动物饲料，其包含与SEQ ID NO:1具有至少80％序列同一性的热稳定丝氨酸蛋白酶，其中所述热稳定丝氨酸蛋白酶以从1-20g/吨饲料的量存在，并且进一步其中所述热稳定丝氨酸蛋白酶可以单独使用或与至少一种直接饲喂微生物组合使用。

6.根据权利要求4所述的饲料添加剂组合物，用于在动物饲料中使用，所述饲料添加剂组合物进一步包含10和至少一种选自以下的组分：蛋白质、肽、蔗糖、乳糖、山梨糖醇、甘油、丙二醇、氯化钠、硫酸钠、乙酸钠、柠檬酸钠、甲酸钠、山梨酸钠、氯化钾、硫酸钾、乙酸钾、柠檬酸钾、甲酸钾、乙酸钾、山梨酸钾、氯化镁、硫酸镁、乙酸镁、柠檬酸镁、甲酸镁、山梨酸镁、焦亚硫酸钠、对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯。

7.一种用于在动物饲料中使用的颗粒状饲料添加剂组合物，其包含与SEQ ID NO:3、8或10具有至少80％序列同一性的热稳定丝氨酸蛋白酶，所述热稳定丝氨酸蛋白酶可以单独使用或与至少一种直接饲喂微生物组合使用，其中所述颗粒状饲料添加剂组合物包含通过选自以下的方法产生的颗粒：高剪切制粒、鼓式制粒、挤出、滚圆、流化床附聚、流化床喷涂、喷雾干燥、冷冻干燥、造粒、喷雾冷却、旋转式圆盘雾化、凝聚、压片或上述方法的任何组合。

8.根据权利要求7所述的颗粒状饲料添加剂组合物，其中所述颗粒的平均直径大于50微米并且小于2000微米。

9.根据权利要求7所述的饲料添加剂组合物，其中所述组合物呈液体形式。

10.根据权利要求9所述的饲料添加剂组合物，其中所述组合物呈适合于在饲料丸粒上喷雾干燥的液体形式。

11.一种用于水解含淀粉材料的方法，所述方法包括：

(a)使含淀粉材料与液体接触以形成醪液；以及

(b)通过使醪液与酶混合物接触而水解醪液中的淀粉以形成液化物，所述酶混合物包含与SEQ ID NO:3、8或10具有至少80％序列同一性的热稳定丝氨酸蛋白酶。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述酶混合物进一步包含至少一种选自以下的酶：α-淀粉酶、淀粉葡糖苷酶、肌醇六磷酸酶、支链淀粉酶、β-葡聚糖酶、纤维素酶和木聚糖酶。

13.一种用于从含淀粉材料生产发酵产物的方法，所述方法包括：

(a)用酶混合物液化所述含淀粉材料，所述酶混合物包含与SEQ ID NO:3、8或10具有至少80％序列同一性的热稳定丝氨酸蛋白酶；

(b)糖化步骤(a)的产物；

(c)用合适的生物体进行发酵；以及

(d)任选地，回收步骤(c)中产生的产物。

14.根据权利要求13所述的方法，其中，同时进行步骤(b)和(c)。