[发明专利]血红蛋白的糖化率测定方法

权利要求书

1.一种糖化血红蛋白比率的测定方法，其包括以下的工序(1)～(5)：

工序(1)，使具有磺基的化合物与包含糖化血红蛋白的试样接触；

工序(2)，使糖化氨基酸氧化酶作用于包含糖化血红蛋白的试样，生成过氧化氢；

工序(3)，使工序(2)中生成的过氧化氢在过氧化物酶存在下与显色底物接触，生成显色色素；

工序(4)，测定工序(3)中得到的显色色素的显色量；和，

工序(5)，将工序(4)中得到的显色量代入校准曲线，算出糖化血红蛋白比率，所述校准曲线是利用以糖化血红蛋白比率定值的糖化血红蛋白校准品预先制作的、糖化血红蛋白比率与显色量的校准曲线。

2.根据权利要求1所述的测定方法，其中，作为所述工序(5)中使用的糖化血红蛋白校准品，使用以2个水平以上的糖化血红蛋白比率定值的糖化血红蛋白校准品，将测定结束时的反应液中的总血红蛋白浓度最低者设为1时，其他者的总血红蛋白浓度为其1倍～6倍的浓度。

3.根据权利要求1或2的测定方法，其还包括以下的工序(6)：

工序(6)，通过蛋白酶的作用，将糖化血红蛋白分解成糖化血红蛋白分解物。

4.根据权利要求1～3中任一项所述的测定方法，其还包括以下的工序(7)：

工序(7)，使包含糖化血红蛋白的试样溶血。

5.根据权利要求1～4中任一项所述的测定方法，其中，所述工序(1)中使用的具有磺基的化合物为选自由苯磺酸、烷基磺酸、萘磺酸、磺基琥珀酸、苯并噻唑啉磺酸、蒽醌磺酸、樟脑磺酸、苯并噁二唑磺酸、和它们的衍生物、以及它们的盐组成的组中的至少1种化合物。

6.根据权利要求1～5中任一项所述的测定方法，其中，所述工序(1)中使用的具有磺基的化合物为选自由十二烷基苯磺酸、3-氨基苯磺酸、烷基二苯基醚磺酸、4-氨基偶氮苯-4’-磺酸、4-氨基-4’-硝基茋-2,2’-二磺酸、4,4’-二偶氮茋-2,2’-二磺酸、对氨基苯磺酸、5-磺基间苯二甲酸、5-氨基-2-氯甲苯-4-磺酸、烷基萘磺酸、2-萘磺酸、8-氨基-1-萘磺酸、十二烷基萘磺酸、磺基琥珀酸二-2-乙基己酯、二烷基磺基琥珀酸、和它们的盐组成的组中的至少1种化合物。

7.根据权利要求1～6中任一项所述的测定方法，其中，所述工序(3)中使用的显色底物为隐色型色原体。

8.根据权利要求1～7中任一项所述的测定方法，其中，所述工序(3)中使用的显色底物为吩噻嗪系的隐色型色原体。

9.根据权利要求1～8中任一项所述的测定方法，其中，所述工序(3)中使用的显色底物为选自由10-(羧甲基氨基羰基)-3,7-双(二甲氨基)吩噻嗪钠盐、10-N-羧甲基氨基甲酰基-3,7-双(二甲氨基)-10H-吩噻嗪、和10-N-甲基氨基甲酰基-3,7-双(二甲氨基)-10H-吩噻嗪组成的组中的至少1种吩噻嗪系的隐色型色原体。

10.根据权利要求1～9中任一项所述的测定方法，其中，所述工序(3)中使用的显色底物为10-(羧甲基氨基羰基)-3,7-双(二甲氨基)吩噻嗪钠盐。

11.根据权利要求1～10中任一项所述的测定方法，其以1通道实施。

12.一种糖化血红蛋白比率的测定试剂盒，其包含以下的试剂(a)～(e)：

试剂(a)，其含有具有磺基的化合物；

试剂(b)，其含有糖化氨基酸氧化酶；

试剂(c)，其含有过氧化物酶；

试剂(d)，其含有在过氧化物酶存在下与过氧化氢接触而生成显色色素的显色底物；和，

糖化血红蛋白校准品(e)，其以糖化血红蛋白比率定值。