[发明专利]结核分枝杆菌蛋白诊断测定和结核病检测和诊断装置

说明书

本发明提供一种检测来自受试者的样品中抗体的方法，其中所述抗体于结核分枝杆菌抗原表位结合，所述方法包括:使所述样品与两种或多种分离的多肽或其抗原性片段或变体接触，其中所述多肽包含选自SEQ ID NO：1、3、5、7、9、11、13和15的多肽；和检测包含所述分离的多肽或其抗原性片段或变体的抗体‑肽复合物的形成，其中所述复合物的形成表明所述样品中存在针对结核分枝杆菌抗原表位的抗体。

相关申请的交叉引用

本申请要求2016年9月22日提交的美国临时申请No.62/398213的权益，其内容通过引用整体并入本文。

通过引用并入以电子方式提交的材料

通过引用整体并入本文的为与本文同时提交并且如下标识的计算机可读序列表：2017年11月22日创建的名为“sequence_listing.txt”的一个19513字节ASCII(文本)文件。

技术领域

本发明涉及传染病，尤其涉及医学诊断和检测结核感染的方法。

发明背景

传统上，结核病(TB)的诊断基于提示结核病的体征和症状以及适当的胸部X射线变化和痰中分枝杆菌(涂片阳性结核病)和结核病阳性培养物的证明。为了得到阳性涂片，痰液样本中结核菌的数量必须超过一定的检测阈值。结核病培养通常是缓慢而费力的，许多实验室可能没有适当的设施和专业知识。因此，结核病皮肤试验，结核菌素皮肤试验(TST)除了用于涂片和培养外，还常常用于在患有相关症状和X射线变化的患者中建立结核病诊断。结核菌素皮肤试验可用于诊断潜伏性结核病，但需要两次就诊和技术人员进行试验放置和解释。此外，结核菌素皮肤试验通常不会将潜伏性结核感染与先前用牛分枝杆菌卡介苗(BCG)接种或环境分枝杆菌感染分开，因为TST利用结核菌素纯化蛋白衍生物(PPD)作为抗原成分。一项重大进展是鉴定早期分泌的抗原靶标6kD蛋白(ESAT-6)和培养滤液蛋白10(CFP10)。ESAT-6和CFP-10由所有结核分枝杆菌和致病性牛分枝杆菌菌株分泌，但不存在于所有卡介苗(BCG)疫苗株和常见的非结核分枝杆菌(NTM)中，M.kansasii、M.szulgai及M.marinum.除外。Colangeli等人,Infect.Immun.2000；68:990–993；Harboe等人,Infect.Immun.1996；64:16–22.

鉴于这些测定的繁琐性质-涂片、培养物和TST、-耗时、需要独特的专业知识和设施(培养)、回访诊所(TST)，人们对其他可用于建立结核病诊断的血液标志物产生了强烈的兴趣。这些领域的进展已经导致至少两种商用检测-TSPOT-TB和QuantiFeronTB-Gold。这两种测试基本上都能检测到与结核分枝杆菌特异性抗原(ESAT6和CFP10)反应的血液T细胞。这些测试包括用与ESAT6和CFP10或全长重组抗原相对应的肽形式的抗原刺激血淋巴细胞，然后用酶联免疫测定(QuantiFeronTB-Gold)测量T细胞分泌的干扰素γ(IFN-γ)、或用酶联免疫斑点试验(TSPOT-TB)检测产生干扰素-γ的细胞。

虽然这些基于T细胞的ELISA法TB试验在结核病诊断中比TST有明显改善，但仍存在许多警告和问题。例如，基于ELISA法的这些IGRAs的实验室密集性是有问题的，尤其是在资源贫乏的环境下。基于T细胞的试验的替代方案是基于结核特异性抗体检测的测定。