[发明专利]通过侧流免疫测定测量TRAIL

说明书

公开了一种测量有需要的受试者的流体样品中TNF相关凋亡诱导配体(TRAIL)多肽的量的方法。所述方法使用一种侧流免疫测定(LFI)装置。

发明领域和背景

本发明在其一些实施方案中涉及使用侧流免疫测定测量TRAIL多肽的方法。该测定可用于多种不同的应用，包括区分细菌和病毒感染以及患者的总体预后。

抗生素(Abx)为世界上开具处方最多的药物种类，全球市场价值250-300亿美元。Abx也是世界上滥用最多的药物，其中所有药物中很大一部分(40-70％)被错误开具处方。

一种类型的Abx滥用为在非细菌性疾病，比如病毒感染(对此Abx无效)的情况下给予药物。例如，根据美国疾病控制和预防中心CDC，在美国每年给予超过6000万次错误的Abx处方用于治疗流感。Abx处方过量的卫生保健和经济后果包括：(i) 全球不必要开具处方的抗生素成本估计每年> 100亿美元；(ii) 由不必要的Abx治疗引起的副作用正在降低卫生保健质量，引起并发症和住院时间延长(例如变态反应、Abx相关性腹泻、肠酵母菌等)，和(iii) 由于过度使用导致细菌的耐药菌株的出现(CDC已经宣称细菌的抗生素耐药性上升为“21世纪世界上最紧迫的健康问题之一”)。

抗生素处方不足也不少见。例如，在美国高达15％的成人细菌性肺炎住院患者接受延迟或无Abx治疗，即使在早期治疗可挽救生命并减少并发症的这些情况下。

感染性疾病诊断技术有可能减少与Abx滥用相关的健康和经济负担。理想地，这种技术应该：(i) 准确地区分细菌和病毒感染；(ii) 快速(几分钟内)；(iii) 能够区分病原和非病原菌(作为身体自然菌群的一部分)；(iv) 区分混合型共感染和纯病毒感染；和(v)可适用于其中病原体不可获得的情况(例如鼻窦炎、肺炎、中耳炎、支气管炎等)。

目前的解决方案(比如培养、PCR和免疫测定)不能满足所有这些需要：(i) 一些测定产生的诊断准确性差(例如灵敏度或特异性低)，并且限于一组有限的细菌或病毒株；(ii) 它们经常需要数小时到数天；(iii) 它们不区分病原菌和非病原菌，因此导致假阳性；(iv) 它们经常未能区分混合型和纯病毒感染；和(v) 它们需要对其中寻找致病因子踪迹的感染部位直接取样，因此禁止在其中病原体存在于不可及组织的情况下(经常是这种情况)进行诊断。

结果，仍然存在诊断空白，这反过来又经常导致医生Abx处方过量(“以防万一”)或者Abx处方不足(“观望方法”)，这两者都会产生深远的健康和经济后果。

因此，需要解决这些挑战的准确区分细菌、病毒、混合型和非感染性疾病患者的快速方法。

背景技术包括Leung W., et al., J. Immunol. Methods. 2008; 336:30-36.doi: 10.1016/j.jim.2008.03.009和WO 2013/117746。

发明概述

根据本发明的一些实施方案的方面，提供使用侧流免疫测定(LFI)装置测量有需要的受试者的流体样品中TNF相关凋亡诱导配体(TRAIL)多肽的量的方法，方法包括：

(a) 使流体样品与包含结合垫的侧流测试条接触，结合垫包含针对TRAIL多肽的标记抗体，其中标记抗体不包含金纳米颗粒，其中接触于使得能够在标记抗体和样品的TRAIL多肽之间形成免疫复合物的条件下实现；

(b) 使未结合的标记抗体或免疫复合物流过测试带；和

(c) 通过分析测试带处未结合的标记抗体或免疫复合物的量来确定TRAIL多肽的量。

根据本发明的一些实施方案的方面，提供测量有需要的受试者的流体样品中TNF相关凋亡诱导配体(TRAIL)多肽和CRP多肽的量的方法，方法包括：