[发明专利]用于基因组改造的杂合核酸序列在审
申请号: | 201780048145.0 | 申请日: | 2017-05-30 |
公开(公告)号: | CN109642232A | 公开(公告)日: | 2019-04-16 |
发明(设计)人: | A·赫梅尔 | 申请(专利权)人: | KWS种子欧洲股份公司 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/82 |
代理公司: | 永新专利商标代理有限公司 72002 | 代理人: | 左路;区斌 |
地址: | 德国*** | 国省代码: | 德国;DE |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 核酸序列 杂合 分子复合物 基因组改造 真核细胞 原核 植物或植物细胞 体内基因 物理位置 植物材料 植物细胞 非共价 复合物 构建体 多肽 共价 修饰 后代 应用 | ||
1.一种包含至少一个RNA和至少一个DNA核酸序列或由至少一个RNA和至少一个DNA核酸序列组成的杂合核酸序列,其包括:
(a)CRISPR核酸序列,含有至少一个RNA核酸序列,其中所述CRISPR核酸序列包括
(i)与第一DNA靶序列互补的第一序列部分,和
(ii)第二序列部分,其中第二序列部分配置成与CRISPR多肽相互作用;
并包括与所述CRISPR核酸序列相关联的:
(b)修复模板核酸序列,包括DNA核酸序列,其中所述修复模板核酸序列包括与第二DNA靶序列互补的至少一个部分,且其中所述修复模板核酸序列配置成介导靶向同源指导的修复;和
(c)任选地:所述CRISPR核酸序列与所述修复模板核酸序列之间的接头区;
其中所述杂合核酸序列能与CRISPR多肽相互作用,从而CRISPR多肽能识别第一DNA靶序列并任选地诱导DNA断裂,且其中所述杂合核酸序列指导基因组改造,所述基因组改造是通过在第二DNA靶序列位点处由修复模板核酸序列介导的同源指导的修复。
2.如权利要求1所述的杂合核酸序列,其特征在于,所述修复模板核酸序列和/或CRISPR核酸序列包括选自天然或非天然存在的核苷酸序列的核苷酸序列,包括合成核苷酸序列,任选地包括主链和/或碱基修饰,其中CRISPR核酸序列包括单链或部分单链的RNA核苷酸序列,且其中所述修复模板核酸序列包括单链或双链DNA核苷酸序列。
3.如权利要求1或2所述的杂合核酸序列,其特征在于,所述修复模板核酸序列在CRISPR核酸序列3’末端与CRISPR核酸序列相关联,和/或其中所述修复模板核酸序列与CRISPR核酸序列5’末端相关联,和/或其中修复模板核酸序列位于CRISPR核酸序列内。
4.如前述权利要求中任一项所述的杂合核酸序列,其特征在于,至少一个修复模板核酸序列共价连接至少一个CRISPR核酸序列,和/或其中至少一个修复模板核酸序列非共价连接至少一个CRISPR核酸序列。
5.一种分子复合物,所述复合物包括至少一个权利要求1-4中任一项所述杂合核酸序列和至少一个CRISPR多肽,其中至少一个杂合核酸序列和至少一个CRISPR多肽以有功能的方式相关联。
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