[发明专利]用于基因组改造的杂合核酸序列在审

专利信息
申请号: 201780048145.0 申请日: 2017-05-30
公开(公告)号: CN109642232A 公开(公告)日: 2019-04-16
发明(设计)人: A·赫梅尔 申请(专利权)人: KWS种子欧洲股份公司
主分类号: C12N15/113 分类号: C12N15/113;C12N15/82
代理公司: 永新专利商标代理有限公司 72002 代理人: 左路;区斌
地址: 德国*** 国省代码: 德国;DE
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摘要:
搜索关键词: 核酸序列 杂合 分子复合物 基因组改造 真核细胞 原核 植物或植物细胞 体内基因 物理位置 植物材料 植物细胞 非共价 复合物 构建体 多肽 共价 修饰 后代 应用
【权利要求书】:

1.一种包含至少一个RNA和至少一个DNA核酸序列或由至少一个RNA和至少一个DNA核酸序列组成的杂合核酸序列,其包括:

(a)CRISPR核酸序列,含有至少一个RNA核酸序列,其中所述CRISPR核酸序列包括

(i)与第一DNA靶序列互补的第一序列部分,和

(ii)第二序列部分,其中第二序列部分配置成与CRISPR多肽相互作用;

并包括与所述CRISPR核酸序列相关联的:

(b)修复模板核酸序列,包括DNA核酸序列,其中所述修复模板核酸序列包括与第二DNA靶序列互补的至少一个部分,且其中所述修复模板核酸序列配置成介导靶向同源指导的修复;和

(c)任选地:所述CRISPR核酸序列与所述修复模板核酸序列之间的接头区;

其中所述杂合核酸序列能与CRISPR多肽相互作用,从而CRISPR多肽能识别第一DNA靶序列并任选地诱导DNA断裂,且其中所述杂合核酸序列指导基因组改造,所述基因组改造是通过在第二DNA靶序列位点处由修复模板核酸序列介导的同源指导的修复。

2.如权利要求1所述的杂合核酸序列,其特征在于,所述修复模板核酸序列和/或CRISPR核酸序列包括选自天然或非天然存在的核苷酸序列的核苷酸序列,包括合成核苷酸序列,任选地包括主链和/或碱基修饰,其中CRISPR核酸序列包括单链或部分单链的RNA核苷酸序列,且其中所述修复模板核酸序列包括单链或双链DNA核苷酸序列。

3.如权利要求1或2所述的杂合核酸序列,其特征在于,所述修复模板核酸序列在CRISPR核酸序列3’末端与CRISPR核酸序列相关联,和/或其中所述修复模板核酸序列与CRISPR核酸序列5’末端相关联,和/或其中修复模板核酸序列位于CRISPR核酸序列内。

4.如前述权利要求中任一项所述的杂合核酸序列,其特征在于,至少一个修复模板核酸序列共价连接至少一个CRISPR核酸序列,和/或其中至少一个修复模板核酸序列非共价连接至少一个CRISPR核酸序列。

5.一种分子复合物,所述复合物包括至少一个权利要求1-4中任一项所述杂合核酸序列和至少一个CRISPR多肽,其中至少一个杂合核酸序列和至少一个CRISPR多肽以有功能的方式相关联。

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