[发明专利]用于细胞免疫疗法的组合物和方法

说明书

提供了用于治疗表现出表达GPC3的实体瘤的受试者的方法，其包括向所述受试者施用抗GPC3嵌合抗原受体免疫应答细胞，其中所述施用在使所述受试者经受淋巴细胞减少治疗之后或与该治疗同时进行。还提供了在所述方法中使用的药剂盒。

交叉引用

本申请要求于2016年4月22日提交的中国专利申请号CN201610256568.9的权益，其内容以其整体并入本文。

背景技术

癌症在全球范围内具有重大社会影响。2016年，预计仅在美国就有1,685,210例新诊断的癌症病例，595,690人将死于这种疾病。根据Journal of Oncology Practice(Erikson 2007)，到2020年，1820万美国人中大约每19人中就有1人会是癌症患者或癌症幸存者，相比2005年的1170万美国人(每26人中有1人)有所提高。

嵌合抗原受体(CAR)是抗原的重组受体，其以单个分子重新定向T细胞和其他免疫细胞的特异性和功能。CAR在癌症免疫疗法中的使用可绕过主动免疫的障碍，快速产生靶向肿瘤的T细胞。一旦在细胞中表达，CAR修饰的细胞可在受试者中发挥即时和长期的作用。

嵌合抗原受体(CAR)T细胞疗法通过编辑癌症患者的T细胞以识别其肿瘤，该疗法已显示出对治疗血液癌症有效。在最近的临床试验中，CAR T细胞疗法显著改善了患有晚期、以其他方式无法治愈的白血病和淋巴瘤的血液癌症患者的治疗结果。相比之下，CAR T细胞对于实体瘤的治疗面临着一系列独特的挑战。其中的挑战包括鉴定其表达能够清楚地将肿瘤与正常组织相区分开的抗原，以及在肿瘤内建立肿瘤细胞的有效杀伤并因此减小肿瘤大小。

发明内容

在针对多种实体瘤的替代治疗和有效治疗方面存在迫切需要。本发明解决了这种需要，并且也提供了相关优点。因此，本发明公开了治疗表现出可表达磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC3)的实体瘤的受试者的方法。在一些情况下，所述方法可包括向受试者施用抗GPC3嵌合抗原受体免疫应答细胞。在一些情况下，施用可在使受试者经受淋巴细胞减少治疗之后或同时进行。在一些情况下，免疫应答细胞可以是NK细胞(抗GPC3-CAR NK细胞)或T细胞(抗GPC3-CAR T细胞)。在一些情况下，向受试者施用抗GPC3-CAR T细胞可在使受试者经受淋巴细胞减少治疗之后进行。在一些情况下，可向受试者施用至少约5x10⁴个抗GPC3-CAR T细胞/kg。在一些情况下，向受试者施用约5x10⁴至约1x10¹²个抗GPC3-CAR T细胞/kg。施用可有效地将肿瘤大小减小至少30％，如通过计算机断层成像(CT)扫描所测量的。在一些情况下，施用可有效地稳定肿瘤大小，测量为肿瘤病变的直径的基线测量变化小于10％，如通过计算机断层成像(CT)扫描所测量的。在一些情况下，与单独施用抗GPC3-CAR T细胞相比，施用抗GPC3-CAR T细胞并使受试者经受淋巴细胞减少治疗可协同地使受试者的中位存活时间延长至少约6个月。在一些情况下，实体瘤可以是肝癌、胃癌、甲状腺癌(例如，甲状腺肿瘤)、肺癌、乳腺癌、头颈癌、卵巢癌、肾癌、膀胱癌、宫颈癌、胰腺癌、脂肪肉瘤、睾丸非精原细胞瘤性(noneminomatous)生殖细胞癌、黑素瘤、肾上腺腺瘤、神经鞘瘤、恶性纤维组织细胞瘤或食管癌。在一些情况下，抗GPC3嵌合抗原受体可包括可以与GPC3的C末端表现出特异性结合的抗原结合单元。在一些情况下，抗原结合单元可包含与SEQ ID NO:1、SEQ IDNO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8表现出至少50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或至多约100％序列同源性的序列。在一些情况下，抗GPC3-CAR可包含与SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18、SEQID NO:19、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:24、SEQID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:29或SEQ ID NO:30表现出至少50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或至多约100％序列同一性的序列。抗GPC3-CAR可包含与SEQID NO 28至30中的任一种表现出至少50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或至多约100％序列同一性的序列。在一些情况下，抗GPC3-CAR T细胞可包含至少两个细胞内信号传导结构域。在一些情况下，抗GPC3-CAR T细胞可包含至少三个细胞内信号传导结构域。细胞内信号传导结构域可选自衍生自CD3、CD28、4-1BB、OX40、DAP10或ICOS的信号传导结构域。在一些情况下，淋巴细胞减少治疗可包括减少受试者中的调节性T细胞的量。减少调节性T细胞的量可包括减少至少约30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或更多的调节性T细胞，如通过受试者中的循环CD4⁺和CD25⁺细胞的流式细胞术分析所测量的。在一些情况下，淋巴细胞减少治疗可包括向受试者施用辐射或生物剂。淋巴细胞减少治疗还可包括向受试者施用化疗。向受试者施用化疗可包括施用选自环磷酰胺、氟达拉滨、依托泊苷、阿糖胞苷、甲氨蝶呤、长春新碱、阿霉素及其任意组合的化疗剂。在一些情况下，可在施用抗GPC3-CAR T细胞之前向受试者施用至少一次化疗剂。在一些情况下，淋巴细胞减少治疗可使淋巴细胞的量减少至少约20％，如通过全血细胞计数(CBC)分析所测量的。