[发明专利]用于组织特异性表达的修饰的U6启动子系统

权利要求书

1.一种核酸分子，其包含修饰的U6启动子序列、包含至少一个去靶序列的miRNA的成熟引导链和在5'端处的5至6个胸苷。

2.根据权利要求1所述的核酸分子，其中所述去靶序列是miRNA-122或miRNA 208的结合位点。

3.根据权利要求1或2所述的核酸分子，其中所述修饰的U6启动子序列至少包含近端序列元件(PSE)区域或远端序列元件(DSE)中的取代、插入或缺失。

4.根据权利要求1或2所述的核酸分子，其中所述修饰的U6启动子序列包含在PSE序列中在核苷酸-66处将胞嘧啶取代为胸苷、在核苷酸-57处将胞嘧啶取代为胸苷，并且在核苷酸-52处将胸苷取代为胞嘧啶。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的核酸分子，其中所述miRNA的成熟引导链是miDUX4、miRN92、miRNA-17、miRNA-18a、miRNA-19a、miRNA-20a、miRNA-19b-1、mi-RNA-26a、miRNA-126、miRNA-335、let-7a和let-7b、miRNA-34、miR-34a、miRNA-10b、miRNA-208、miRNA-499、miRNA-195、miRNA-29a、miRNA-29b或miRNA-29c。

6.根据权利要求1至4中任一项所述的核酸分子，其中所述miRNA的成熟引导链包含SEQID NO：8482、SEQ ID NO：8372、SEQ ID NO：8371、SEQ ID NO：8370、SEQ ID NO：8367、SEQ IDNO：8366、SEQ ID NO：8365、SEQ ID NO：8219、SEQ ID NO：8218、SEQ ID NO：8152、SEQ IDNO：8147、SEQ ID NO：8145、SEQ ID NO：7397、SEQ ID NO：7396、SEQ ID NO：7395、SEQ IDNO：7108、SEQ ID NO：7107、SEQ ID NO：7106、SEQ ID NO：6633、SEQ ID NO：6631、SEQ IDNO：6622、SEQ ID NO：6619、SEQ ID NO：6609、SEQ ID NO：6608、SEQ ID NO：6568、SEQ IDNO：6561、SEQ ID NO：6560、SEQ ID NO：10971或SEQ ID NO：10972的核苷酸序列。

7.根据权利要求1至4中任一项所述的核酸分子，其中所述miRNA的成熟引导链是miDUX4。

8.根据权利要求1至4中任一项所述的核酸分子，其包含SEQ ID NO：1、2或10913-10968中的任一个的核酸序列。

9.一种载体，其包含根据权利要求1至8中任一项所述的核酸分子。

10.根据权利要求9所述的载体，其中所述载体是质粒、腺相关病毒、腺病毒、逆转录病毒、慢病毒、马相关病毒、甲病毒、痘病毒、疱疹病毒、脊髓灰质炎病毒、辛德毕斯病毒或牛痘病毒。

11.一种重组腺相关病毒，其包含根据权利要求1至8中任一项所述的核酸分子。

12.根据权利要求11所述的重组腺相关病毒，其中AAV是AAV6、AAV rh.74或AAV-B1。

13.一种组合物，其包含根据权利要求9或10所述的载体或根据权利要求11或12所述的重组腺相关病毒。

14.一种抑制细胞中基因表达的方法，其包含使所述细胞与包含根据权利要求1至8中任一项所述的核酸分子的重组腺相关病毒或根据权利要求13所述的组合物接触。