[发明专利]嵌合蛋白和调节基因表达的方法

权利要求书

1.一种用于调节细胞中靶多核苷酸的表达的系统，其特征在于，所述系统包括：

(a)结合抗原后经修饰的嵌合受体多肽，其中受体修饰包括构象改变或化学修饰；

(b)响应受体修饰的与受体结合的嵌合衔接子多肽；

(c)包含与切割识别位点相连的致动部分的基因调节多肽(GMP)，其中在切割识别位点被切割后，所述致动部分被激活以与靶多核苷酸形成复合物；和

(d)当接近切割识别位点时切割所述切割识别位点的切割部分；

其中：

(i)GMP构成嵌合受体多肽的胞内区的一部分，并且切割部分构成嵌合衔接子多肽的一部分；(ii)GMP构成嵌合衔接子多肽的一部分，并且切割部分构成嵌合受体多肽的胞内区的一部分；或(iii)为响应受体修饰，切割部分与结合嵌合受体多肽的第二衔接子多肽形成复合物，并且GMP构成嵌合衔接子多肽的一部分。

2.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述受体不包含SEQ ID NO：39。

3.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述靶多核苷酸是基因组DNA。

4.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述靶多核苷酸是RNA。

5.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述修饰是磷酸化。

6.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述致动部分是Cas蛋白，并且所述系统还包含与Cas蛋白形成复合物的向导RNA。

7.如权利要求1所述的系统，其特征在于，(i)所述致动部分是RNA结合蛋白(RBP)，任选地与向导RNA形成复合物，和(ii)所述系统还包含能够与向导RNA形成复合物的Cas蛋白。

8.如权利要求6或7所述的系统，其特征在于，所述Cas蛋白基本上不具有DNA切割活性。

9.如权利要求1所述的系统，其特征在于，(i)GMP构成嵌合衔接子多肽的一部分，(ii)切割识别位点的切割有效地从受体释放嵌合衔接子多肽，和(iii)所述系统还包含嵌合衔接子多肽，其包含与经修饰的受体结合的GMP。

10.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述受体修饰包括在多个修饰位点处的修饰，并且每个修饰位点有效地结合衔接子多肽。

11.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述切割识别位点包含多肽序列，并且所述切割部分包含蛋白酶活性。

12.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述切割识别位点包含二硫键，并且所述切割部分包含氧化还原酶活性。

13.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述切割识别位点包含内含肽序列的第一部分，其与所述内含肽序列的第二部分反应以释放所述致动部分。

14.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述受体是跨膜受体。

15.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述受体是核受体。

16.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述致动部分通过靶多核苷酸的物理阻碍或有效抑制或增强靶多核苷酸的表达的额外因子的募集来调节靶多核苷酸的表达。

17.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述致动部分包含有效增加靶多核苷酸的表达的激活因子。

18.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述致动部分连接至少一个核定位信号(NLS)。