[发明专利]干燥扩增组合物

说明书

本公开提供一种干燥组合物，其提供用于核酸扩增的试剂，所述干燥组合物基本上不含无机盐。不含无机盐可以提高这类组合物的稳定性并且减少副产物的形成。在重组时供应所述组合物中使用酶所需的盐。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2016年2月5日提交的美国临时专利申请号62/291,770的权益，所述临时申请通过引用结合在此。

背景技术

用于进行核酸扩增和/或检测反应的商业试剂盒通常含有如酶等试剂，所述试剂包含如DNA依赖性DNA聚合酶或RNA依赖性DNA聚合酶等聚合酶(例如，逆转录酶)、核苷酸、洗涤剂、缓冲液、引物、探针和无机盐中的一种或多种，所述无机盐包含MnCl₂、MgCl₂、NaCl和KCl(Innis等人，(1990)《PCR协议：方法和应用指南，第1章，PCR的优化(PCR Protocols：AGuide to Methods and Applications,Ch.1,Optimizations of PCRs)》。无机盐适用于稳定核酸反应混合物的某些组分并且进行基于核酸的反应的某些步骤。然而，这些相同的盐是在使用前将要冻干和/或储存的配制品的不合需要的组分，因为这些盐对冻干组合物的稳定性和干燥性具有不利影响。

据报道，镁离子可以增加聚合酶和其它酶的活性。据报道，氯化钾可以促进核酸杂交。还据报道，许多无机盐，包含具有镁的无机盐，在各种包含加热、离液剂暴露和冻干的应力条件下保护蛋白质(参见例如Liu等人(2007)《FEBS快报(FEBS Letters)》581：1047；Kanaya等人(1996)《生物化学期刊(J.Biol.Chem.)》271：32729；Innis等人，(1990)《PCR协议：方法和应用指南，第1章，PCR的优化(PCR Protocols：A Guide to Methods andApplications,Ch.1,Optimizations of PCRs)》；Menendez等人(1998)《生物化学期刊(J.Biol.Chem.)》273：167；Janeway等人(1993)《生物化学(Biochemistry)》32：1601；Fox等人(1971)《生物化学期刊(J.Biol.Chem.)》246：5739；Chang等人(2002)《生物化学期刊(J.Biol.Chem.)》277：277：4663；Rutter等人(1958)《生物化学期刊(J.Biol.Chem.)》233：374；Huszar等人(1981)《病毒学期刊(J.Virol.)》第37期，第580到588页；Wang(2000)《国际制药学期刊(Int.J.Pharmaceutics)》第203期，第1到160页)。

据信，反应混合物中需要存在盐以避免酶变性。然而，冻干物质的稳定性受冻干饼中存在的任何盐的吸湿性的影响。冻干物质的吸湿性又影响可用于包装冻干物质的时间，并且影响冻干物质可以被储存和运输的持续时间和条件。冻干物质的不合需要的再水合会不利地影响冻干组分的活性。为了使来自冻干物质的不合需要的再水合的不利影响最小化，通常在冷藏的情况下长期储存这类物质。

发明内容

本文公开了一种包括水溶液的组合物，所述水溶液含有聚合酶和/或逆转录酶、膨胀剂、洗涤剂和有机缓冲液，其中所述水溶液具有7mM或更小的无机盐浓度。