[发明专利]一种扩繁家蚕核型多角体病毒的方法在审
申请号: | 201711500879.6 | 申请日: | 2017-12-18 |
公开(公告)号: | CN108220250A | 公开(公告)日: | 2018-06-29 |
发明(设计)人: | 蔡国祥;林水中;刘桂州;茆迎春;杨俊生 | 申请(专利权)人: | 蔡国祥 |
主分类号: | C12N7/00 | 分类号: | C12N7/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 224002 江苏省盐*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 病毒 扩繁 家蚕核型多角体病毒 接种病毒 临时保存 采收 毒源 家蚕血液型脓病 生产成本低 灭活疫苗 人工接种 时间选择 室温条件 病毒液 多角体 多菌灵 提纯 家蚕 配比 制备 生产工艺 保存 申请 生产 | ||
1.一种扩繁家蚕核型多角体病毒的方法,包括毒源病毒的制备、病毒的临时保存、病毒的人工接种、病毒的采收几个步骤,其特征是:病毒的临时保存方法为病毒多角体配制成1.2×104个/毫升~1.4×104个/毫升浓度,按病毒液∶10%氟派酸∶10%多菌灵,1∶0.8~1.2∶0.8~1.2的配比,24~26℃室温条件保存1~2小时。
2.根据权利要求1所述的一种扩繁家蚕核型多角体病毒的方法,包括毒源病毒的制备、病毒的临时保存、病毒的人工接种、病毒的采收几个步骤,其特征是:病毒的保存方法为病毒多角体配制成1.3×104个/毫升,按病毒液∶10%氟派酸∶10%多菌灵,1∶1∶1的配比,25℃室温条件保存1.5小时。
3.根据权利要求1或2任一项所述的一种扩繁家蚕核型多角体病毒的方法,特征是毒源病毒的制备包括以下步骤:病蚕收集、研磨、双层纱布过滤、离心提纯,具体为,病蚕的收集为选取家蚕血液型脓病典型症状的体节肿胀、血液呈乳白色的蚕儿,经1%有效氯漂白粉溶液体表消毒后放入粉碎机中,加入等量的无菌水磨碎,再后用双层纱布过滤,滤去杂质,滤液移入离心机中,3500转/分的转速离心5分钟,倒掉上层澄清液,取下层沉淀,加入5倍的无菌水混合均匀,再离心5分钟,再倒掉上层澄清水,取下层沉淀,再加入5倍的无菌水混合均匀,再离心5分钟,最后显微镜检查沉淀物中多角体密度,配制成1.2×104个/毫升~1.4×104个/毫升浓度。
4.根据权利要求1或2任一项所述的一种扩繁家蚕核型多角体病毒的方法,特征是:病毒的人工接种方法为穿剌接种,接种时,取接种针先进行酒精灯火焰灼烧消毒,再用接种针醮取病毒临时保存液,沿与家蚕身体长度平行方向,从倒数第二腹节的节间膜,由后往前,剌穿家蚕体壁,接种时间选择在家蚕五龄饷食后4~8小时。
5.根据权利要求1或2任一项所述的一种扩繁家蚕核型多角体病毒的方法,特征是:所述病毒的采收时间为,按种病毒后25℃室温条件饲养家蚕90~100小时。
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