[发明专利]一种主成分与其杂质完全分离的检测方法

说明书

本发明公开了一种主成分与其杂质完全分离的检测方法，其特征在于：采用反相高效液相色谱法,以苯基液相色谱柱，采用二极管阵列检测器,采用梯度洗脱程序，以一定比例的缓冲盐溶液一钠盐一有机相为流动相。本发明的优点是：本发明方法专属性强,准确度高,操作简便。

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及一种主成分与其杂质完全分离的检测方法。

背景技术

2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮(主成分)在生产时采用4-(4-氨基苯基)吗啉-3-酮与(S)-(+)-N-(2,3-乙氧基丙基)邻苯二甲酰亚胺反应生成。这两种起始物料中有杂质残留并且在合成主成份的过程中会生成副产物，需在检测过程中控制这些杂质的残留。现有的2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮与其杂质完全分离的检测方法，专属性不强,准确度底,操作复杂。因此，应该提供一种新的技术方案解决上述问题。

发明内容

本发明的目的是提供一种主成分与其杂质完全分离的检测方法。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：

一种利伐沙班中间体与其杂质完全分离的高效液相色谱检测方法采用反相高效液相色谱法,以苯基液相色谱柱，采用二极管阵列检测器,采用梯度洗脱程序，以一定比例的缓冲盐溶液一钠盐一有机相为流动相。

进一步的技术方案：

色谱柱选自安捷伦ZORBAX-SB，250mm*4.6mm*5μm。

所述有机相为甲醇、乙腈、丙醇、异丙醇中的一种。

优选的，所述有机相为甲醇。

所述缓冲盐溶液为磷酸盐、甲酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐、高氯酸盐中的一种。

优选的，所述缓冲盐溶液为磷酸盐，缓冲盐溶液pH为6.8。

所述钠盐为氢氧化钠、乙酸钠、硫酸钠中的一种。

优选的，所述钠盐为氢氧化钠。

一种2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮与其杂质完全分离的检测方法,包括以下几个步骤，

1)、取2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮样品适量，分别用甲醇溶解样品，配制成每lmL含2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮0.1～1.5mg的样品溶液；

2)、设置流动相流速为0.5～1.5mL/min，检测波长为200～240nm，色谱柱柱温箱温度为20～40℃，进样量为5～30μL；

3)、流动相A为pH6.8磷酸盐缓冲液，甲醇为95：5，流动相B为甲醇，梯度洗脱程序为：

进一步的，步骤2)所述的检测波长为220nm流速为1.0ml/min，色谱柱柱温箱为30℃，进样量为10μL

本发明的优点是：本发明方法专属性强,准确度高,操作简便。

附图说明

图1：专属性-空白溶液色谱图

图2：专属性-4-硝酮定位用溶液色谱图

图3：专属性-亚胺定位用溶液色谱图