[发明专利]发热伴血小板减少综合征病毒糖蛋白定量检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种可定量检测发热伴血小板减少综合征病毒糖蛋白的试剂盒，该试剂盒包括针对发热伴血小板减少综合征病毒糖蛋白Gc的两个单克隆抗体，通过双抗体夹心ELISA法实现检测发热伴血小板减少综合征病毒糖蛋白的目的。本发明的检测试剂盒检测浓度范围大，灵敏度高，特异性强，检测成本低，使用方便，适于在疫苗生产领域或临床诊断上推广。

技术领域

本发明属于生物医学领域，涉及一种发热伴血小板减少综合征病毒糖蛋白定量检测试剂盒。

背景技术

发热伴血小板减少综合征病毒(severe fever with thrombocytopeniasyndrome virus，SFTSV)是近年来在我国中东部地区流行的一类新型出血热病毒。该病毒通过蜱虫(长角血蜱，H.longicornis)叮咬的方式感染人及动物，亦可通过密切接触引起人际传播，给罹患地区造成巨大的生命、财产损失。目前我国已有17个省(市、自治区)确认了该病毒的流行，中国邻国日本、韩国等亦有人感染该病毒的报道。

SFTSV在分类学上属于布尼亚病毒科、白蛉病毒属，其基因组由大(L)、中(M)、小(S)三个单股负链RNA片段组成，与布尼亚病毒科其他病毒相似，病毒基因组3′末端和5′末端序列互补。L片段编码RNA依赖的RNA聚合酶；M片段编码糖蛋白前体，翻译后经宿主细胞内蛋白酶的修饰形成Gn和Gc两个糖蛋白；S片段属双义RNA，分别编码核衣壳蛋白NP和非结构蛋白NSs。

对于该病毒引起的自然疫源性疾病的预防，除了实施灭蜱、加强病例监测等策略外，对生活在疫区的易感人群进行有效的疫苗接种是最为根本的手段。SFTSV灭活疫苗目前正在研发过程中，而对该疫苗中的有效成分-病毒颗粒囊膜上糖蛋白(Gn和Gc)的实时动态、定量监测是该疫苗研发过程中一重大技术关键。

本发明专利描述了一种基于双抗体夹心ELISA来定量检测病毒培养上清液中Gc糖蛋白的含量。由于在病毒囊膜上Gn和Gc两种糖蛋白的摩尔数比为1:1，且二者的分子量也大体相当，因此通过对Gc糖蛋白的检测即可获得整个糖蛋白的 含量。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一种发热伴血小板减少综合征病毒糖蛋白定量检测试剂盒。

本发明的目的之二在于提供上述发热伴血小板减少综合征病毒糖蛋白定量检测试剂盒中的包被抗体和检测抗体。

本发明的目的之三在于提供一种利用上述试剂盒检测发热伴血小板减少综合征病毒中糖蛋白的方法。

为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

本发明提供了一种针对发热伴血小板减少综合征病毒糖蛋白Gc的单克隆抗体，所述单克隆抗体包括：

轻链可变区具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列或与其具有至少80％同源性的氨基酸序列；

重链可变区具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列或与其具有至少80％同源性的氨基酸序列；该单克隆抗体命名为1C5-F5。

优选地，1C5-F5抗体的轻链可变区具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列，重链可变区具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。

本发明提供了一种针对发热伴血小板减少综合征病毒糖蛋白Gc的单克隆抗体，所述单克隆抗体包括：

轻链可变区具有SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列或与其具有至少80％同源性的氨基酸序列；

重链可变区具有SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列或与其具有至少80％同源性的氨基酸序列；该单克隆抗体命名为1H6-B10。

优选地，1H6-B10抗体的轻链可变区具有SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列，重链可变区具有SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列。