[发明专利]木聚糖酶HoXyn11A的突变体及其制备方法和用途有效
申请号: | 201711456436.1 | 申请日: | 2017-12-28 |
公开(公告)号: | CN109971737B | 公开(公告)日: | 2020-11-06 |
发明(设计)人: | 武国庆;沈乃东;熊强;李文钊;周娜娜;张宏嘉;李冬敏;陈晓园;冯鹏;王慧丽 | 申请(专利权)人: | 中粮集团有限公司;中粮营养健康研究院有限公司 |
主分类号: | C12N9/24 | 分类号: | C12N9/24;C12N15/56;C12N15/81;C12N1/19;C12P19/14 |
代理公司: | 北京信慧永光知识产权代理有限责任公司 11290 | 代理人: | 董世豪;张淑珍 |
地址: | 100020 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 聚糖 hoxyn11a 突变体 及其 制备 方法 用途 | ||
1.一种木聚糖酶HoXyn11A的S95T-S164T突变体,其中,所述木聚糖酶HoXyn11A的S95T-S164T突变体的氨基酸序列为SEQ ID No.1。
2.一种编码权利要求1所述的木聚糖酶HoXyn11A的S95T-S164T突变体的多核苷酸,其中,所述多核苷酸的序列为SEQ ID No.2。
3.一种重组载体,其中,所述重组载体包含权利要求2所述的编码木聚糖酶HoXyn11A的S95T-S164T突变体的多核苷酸。
4.如权利要求3所述的重组载体,其中,所述重组载体采用选自质粒载体、噬菌体载体和病毒载体中的任一种构建。
5.如权利要求4所述的重组载体,其中,所述重组载体采用选自如下的载体中的一种或多种构建得到:pPIC9K、pPICZα、pGAPZ、pGAPZα、pGAPZαA和pPICZ。
6.如权利要求5所述的重组载体,其中,所述重组载体采用pPIC9K构建得到。
7.一种重组菌,所述重组菌包含权利要求3-6中任一项所述的重组载体或在所述重组菌的基因组中整合有权利要求2所述的多核苷酸。
8.如权利要求7所述的重组菌,其中,用于构建所述重组菌的宿主菌选自毕赤酵母、假丝酵母、多型汉逊酵母、球拟酵母、裂殖酵母和克鲁维酵母。
9.如权利要求8所述的重组菌,其中,所述宿主菌为毕赤酵母。
10.如权利要求9所述的重组菌,其中,所述宿主菌为毕赤酵母GS115。
11.一种制备权利要求1所述的木聚糖酶HoXyn11A的S95T-S164T突变体的方法,其中,所述方法包括:获得编码木聚糖酶HoXyn11A的S95T-S164T突变体的多核苷酸,所述多核苷酸的序列为SEQ ID No.2;将所述多核苷酸与载体进行酶切和连接,得到重组载体;随后,将所述重组载体导入宿主菌中,得到重组菌;对所述重组菌进行培养,从而由所述重组菌产生木聚糖酶HoXyn11A的S95T-S164T突变体。
12.如权利要求11所述的方法,其中,所述载体选自质粒载体、噬菌体载体或病毒载体。
13.如权利要求12所述的方法,其中,所述载体为选自如下的载体中的一种或多种:pPIC9K、pPICZα、pGAPZ、pGAPZα、pGAPZαA和pPICZ。
14.如权利要求13所述的方法,其中,所述载体为pPIC9K。
15.如权利要求11-14中任一项所述的方法,其中,所述宿主菌选自毕赤酵母、假丝酵母、多型汉逊酵母、球拟酵母、裂殖酵母和克鲁维酵母。
16.如权利要求15所述的方法,其中,所述宿主菌为毕赤酵母。
17.如权利要求16所述的方法,其中,所述宿主菌为毕赤酵母GS115。
18.权利要求1所述的木聚糖酶HoXyn11A的S95T-S164T突变体在制备木聚糖水解酶制剂中的用途。
19.如权利要求18所述的用途,其中,所述木聚糖水解酶制剂用于在68-75℃下水解木聚糖。
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