[发明专利]组织中与结直肠癌转移相关的miRNA标志物及其应用

说明书

本发明公开了组织中与结直肠癌转移相关的miRNA标志物及其应用，属于生物技术和医学技术领域，其中，组织中与结直肠癌转移相关的miRNA标志物为miR‑96、miR‑99b、miR‑155、let‑7a和let‑7b中的任意一种或几种。本发明筛选出的组织中与结直肠癌转移相关的miRNA对预测结直肠癌转移的特异性和灵敏度均显著高于目前临床上使用的肿瘤标志物CEA，大大提高了诊断的准确性。

技术领域

本发明涉及生物技术和医学技术领域。更具体地说，本发明涉及组织中与结直肠癌转移相关的miRNA标志物及其应用。

背景技术

结直肠癌(Colorectal cancer，CRC)是常见的消化道癌症之一，并且是全世界癌症相关死亡的第三主要原因。结直肠癌肝转移的发生是一个多因素和多步骤的过程。约20-25％的CRC患者最初被诊断为肝转移，并且高达40-50％的患者在原发性肿瘤切除术后发生肝转移。大多数结直肠肝转移患者不适合根治性手术切除，五年存活率≤10％。

结直肠癌患者肝转移的发生除了与原癌基因及抑癌基因表达情况异常或丢失有关，也与“表观遗传学”，如乙酰化、甲基化和非编码RNA调控紧密相关。有研究证实，在结直肠癌的肝转移发生进展过程中，miRNA广泛参与其调控，有学者称这类miRNA为“metastamiR”。

微小RNA(miRNA)是类长度为18-25个核苷酸的内源非编码RNA，其通过与信使RNA的3'非翻译区(UTR)碱基结合，在转录后水平调节靶基因的表达，从而使翻译受到抑制或信使RNA裂解。高达20-30％的基因的表达由miRNA来调节。通过调节生理和病理过程，差异表达的miRNA在肿瘤的发生、进展、转移和复发中起着重要作用。2003年，Michael首次提出结直肠癌中存在差异表达的miRNA。随后，关于结直肠癌的miRNA的研究越来越多。某研究表明，存在miRNA在结直肠肿瘤发生和发展的不同阶段差异表达(高级别腺瘤-肿瘤早期-肿瘤晚期)。miR-543通过靶向HMGA2，KRAS和MTA1来抑制结直肠癌细胞系的增殖和转移，并且有望成为转移性结直肠癌的新型诊断和预后生物标志物。与健康受试者相比，CRC患者中较高水平的miR-211提示较差的预后。大量的研究表明，循环miRNA可作为潜在的诊断和预后标志物。近年，虽然miRNA已经得到大量的研究和验证，但是结直肠癌肝转移相关miRNA潜在的作用和功能很大程度上仍然未知，需要进一步发现和验证。

结直肠癌肝转移的病人，以手术为主，辅以放化疗、介入治疗及靶向治疗的综合治疗使患者生存时间得到了显著提高。但随着治疗策略的不断提升，新的问题也不断涌现。根治性手术治疗可将结直肠癌肝转移的5年生存率提高至50％，对于选择性高的结直肠癌肝转移患者，甚至可以达到60％；但对于可切除的结直肠癌肝转移病人，术后仍有将近50％的患者会出现肿瘤复发。

传统的筛检方法，如腹腔镜，细针抽吸细胞学和影像学方法，如增强计算机断层扫描(CT)、磁共振成像(MRI)为侵入性的、并发症高或典型指征不足，因此难以成为结直肠癌肝转移患者早期筛选的有效方法。因此，迫切需要寻找早期诊断和预后评估的非侵入性精准的生物标志物，用于结直肠癌患者的诊断和治疗。

发明内容

本发明的目的是提供组织中与结直肠癌转移相关的miRNA标志物及其应用，通过生物信息学方法挖掘与结直肠癌肝转移有关的miRNA标志物，进一步釆用结直肠癌患者的石蜡包埋组织标本进行验证，同时分析差异表达miRNA与结直肠癌诊断的关系。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了与结直肠癌转移相关的miRNA标志物，该标志物在组织中为miR-96、miR-99b、miR-155、let-7a和let-7b中的任意一种或几种。

优选的是，所述的与结直肠癌转移相关的miRNA标志物中，该标志物在组织中为miR-99b、miR-155和let-7a中的任意一种或几种。