[发明专利]一种耐盐纤维素降解菌剂及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种耐盐纤维素降解菌剂，其特征在于，所述耐盐纤维素降解菌剂的活性成分为蜡样芽孢杆菌、斯氏假单孢菌和枯草芽孢杆菌，三者的菌体重量比为2:2:1；且所述耐盐纤维素降解菌剂中总有效活菌数为3×10⁹-6×10⁹CFU/g；或者，

所述耐盐纤维素降解菌剂的活性成分为蜡样芽孢杆菌、斯氏假单孢菌和枯草芽孢杆菌，三者的菌体重量比为3:3:2；且所述耐盐纤维素降解菌剂中总有效活菌数为2×10⁹-4×10⁹CFU/g；

所述纤维素为玉米秸秆、大豆秸秆、棉花秸秆、小麦秸秆或高粱秸秆。

2.根据权利要求1所述耐盐纤维素降解菌剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）将蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)、斯氏假单孢菌(Pseudomonas stutzeri)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)分别接种于NA固体培养基上进行活化；

2）将活化后的菌落分别接种于相应的液体发酵培养基中，在温度20-40℃、180-220rpm条件下震荡培养24-72小时至对数生长期，获得液体菌剂种子液；

3）将上述种子液放大培养后得到浓度适宜的菌液，高速离心后收集菌体制备成干粉状的菌剂，按所需的比例混合，即可。

3.根据权利要求2所述的耐盐纤维素降解菌剂的制备方法，其特征在于，所述NA固体培养基配方为：牛肉膏 3 g，蛋白胨 5 g，酵母浸膏 2 g，葡萄糖 8 g，琼脂粉16 g，去离子水1 L，pH=7.0；和/或，

所述液体发酵培养基配方为：NaCl 0.1 g，MgSO₄·7H₂O 0.3 g，NaNO₃ 2.5 g，KH₂PO₄1.0 g，CaCl₂ 0.1 g，纤维素 20 g·L^-1，加去离子水至 1 L，pH=7.0。

4.权利要求1所述的耐盐纤维素降解菌剂或权利要求2或3所述方法制备的耐盐纤维素降解菌剂在降解纤维素方面的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，应用于沼气发酵，其中沼液的盐含量为0-3%。

6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，在沼气发酵过程中，当秸秆添加量为100-300 g时，所述耐盐纤维素降解菌剂添加量为10-30g。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，降解时间≥15 d。