[发明专利]一种苹果脱毒嫩梢嫁接方法

说明书

本发明提供了一种苹果脱毒嫩梢嫁接方法：预先消毒嫁接工具；对经脱毒处理长至15‑20cm的新梢顶部4‑5cm处的叶片进行带毒情况检测，脱除目标病毒的新梢保留顶端1‑2片幼叶剪下长3‑4cm的梢尖作为接穗；所用无毒砧木为主茎直径≥1.5cm的盆栽无毒一年生砧木苗，于距离地面25‑35cm高度处剪砧；嫁接后梢尖和接口部位套袋保湿，人工气候室内保湿培养10‑15天后练苗，得到苹果脱毒苗。按照本发明提供的方法，可以对成熟度不够、受季节性限制、组培或反季节引种等特殊途径获得的梢尖随时进行苹果苗嫁接保存和繁殖，不仅解决了常规嫁接方法嫩梢嫁接成活率低的问题，还为脱毒苗木繁殖开辟了新的方法。

技术领域

本发明属植物栽培领域，具体涉及一种苹果脱毒嫩梢嫁接方法。

背景技术

苹果病毒病害是严重影响果品产量和品质的主要因素之一。苹果树被病毒侵染后，终生带毒，病毒在果树体内增殖，干扰、破坏树体的正常生理机能，导致长势减退，产量下降，品质变劣，不耐贮藏，给苹果生产造成严重危害。目前，已发现和鉴定的苹果病毒有40多种，其中在世界范围内产生重大危害的主要包括苹果褪绿叶斑病毒(Apple chloroticleaf spot virus,ACLSV)、苹果茎沟病毒(Apple stem grooving virus,ASGV)、苹果茎痘病毒(Apple stem pitting virus,ASPV)、李属坏死环斑病毒(Prunus necrotic ringspotilarvirus,PNRSV)、苹果锈果类病毒(Apple scar skin viroid,ASSVd)和绿皱果病毒(Apple green crinkle virus,AGCV)等6种。苹果植株感染病毒后，在自然条件下无法脱除，为杜绝传染，只能挖除。人工高温处理和微茎尖组织培养是脱除病毒获得无病毒种条、种苗的基本方法。然而茎尖培养脱毒过程中，微茎尖难以再生、是否脱毒受材料数量影响难以检测，微茎尖脱毒仍停留在实验室阶段；而植株高温脱毒处理后脱毒部位主要在新梢顶端的梢尖，接穗过长、过度木质化会降低脱毒率。然而由于梢尖尖端未木质化或半木质化，组织不充实、含水量高、容易脱水，导致脱毒茎尖或梢尖嫁接难以成活，一般成获率在5％以下，极大地限制了脱毒种苗的使用。目前苹果嫁接繁殖中接穗和砧木都采用组织器官充分成熟、枝条木质化或半木质化的新梢或一年生枝进行枝接或芽接，成功率高达90％以上。但脱毒中脱毒茎尖繁殖只能采用梢尖嫁接，为进一步提高梢尖嫁接成活率，本发明提供一种苹果脱毒梢尖嫁接方法，成功率可达90％以上。

发明内容

本发明的目的是针对现有苹果嫁接技术容易携带植物病毒、组培茎尖嫁接成活率低的不足而提供一种可操作性强、成活率高、不易携带病毒的嫁接繁殖方法，采用先对母本植株脱毒处理，检测新梢脱毒情况，对新梢末端未受病毒侵染的梢尖部分取下，再进行嫁接繁殖，解决了常规嫁接不能脱除病毒、茎尖嫁接成活率低且难以操作的问题，可显著提高脱毒材料的嫁接成活率，从而快速获得大量无病毒植株，进而为苹果苗木的无病毒化繁育和无病毒化栽培提供种源和繁殖技术保障。

本发明所采用的技术原理：由于植物的体细胞具有全能性，即任何一个植物体细胞都具植物发育所需要的全部基因，具有发育成母体植株的能力。因此，理论上植物的任意器官都可以进行无性繁殖，形成新的植株，苹果茎尖嫁接和无性繁殖已经证明了其可行性，但不同器官和组织的嫁接成活率可能受环境条件影响。目前，苹果梢尖嫁接成活率低的主要限制因素为：枝条发育不充实，组织含水量高，保水能力差，环境湿度低，容易脱水，导致枝条嫁接后、愈合前脱水干枯。因此，通过创造嫁接后高湿环境条件，减少接口和接穗部位水分散失，可以提高嫁接成活率。

本发明提供的苹果脱毒嫩梢嫁接方法，其为预先消毒嫁接工具；所用无毒砧木为主茎直径≥1.5cm的盆栽无毒一年生砧木苗，于距离地面25-35cm高度处剪砧；对脱毒处理的新梢顶部4-5cm处的叶片进行带毒情况检测，脱除目标病毒的新梢保留顶端1-2片幼叶剪下长3-4cm的梢尖作为接穗；嫁接后梢尖和接口部位套袋保湿，人工气候室内保湿培养10-15天后练苗，得到苹果脱毒苗。

本发明提供的苹果脱毒嫩梢嫁接方法，包括如下步骤：