[发明专利]一种均一组分低聚原花青素的制备方法

权利要求书

1.一种均一组分低聚原花青素的制备方法，包括步骤：

(1)将经灭菌的含有原花青素的物料粉末加入水中，混合均匀得混合物；然后接种微生物进行发酵得发酵物料；所述微生物为米曲霉或绿色木霉；所述含有原花青素的物料为葡萄籽、花生衣或松树皮中的一种或两种以上的组合；所述含有原花青素的物料粉末的粒径为20～80目；所述混合物中水的质量含量为10％～60％；利用质量浓度为20-60％的乙酸水溶液调节混合物的pH为6.5；所述微生物的接种量为0.5～2％；所述发酵温度为28～35℃，静置发酵3～7天，发酵过程中每天进行翻料；

(2)向步骤(1)得到的发酵物料中加入提取液进行提取，取液体，经除去提取液中的有机溶剂得提取物；然后经脱脂得脱脂物，经萃取、干燥得原花青素粗品；

步骤(1)中所述经灭菌的含有原花青素的物料粉末的质量与步骤(2)中所述提取液的体积比为1:2～5kg/L；所述提取温度为室温，超声搅拌提取2～5h；所述脱脂所用溶剂为石油醚、正己烷、环己烷或四氯化碳中的一种；所述溶剂与所述提取物的体积比为1:1～2；所述萃取所用萃取剂为乙酸乙酯、二氯甲烷、三氯甲烷或正丁醇中的一种；所述萃取剂与所述脱脂物的体积比为1:1～2；

(3)将步骤(2)制备的原花青素粗品溶于溶剂a中，过树脂柱，然后进行洗脱，经除去洗脱液、冻干得低聚原花青素；

所述溶剂a为质量浓度为5％的甲醇水溶液；所述原花青素粗品的质量与5％甲醇水溶液的体积比为1:10～20kg/L；所述树脂柱为LH-20凝胶柱；所述凝胶柱为湿法装填，用5wt％的甲醇水溶液平衡；所述洗脱方法为梯度洗脱，依次用质量浓度为5wt％、30wt％、70wt％、95wt％的甲醇水溶液进行洗脱；所述每个质量浓度梯度的甲醇水溶液的用量均为3个树脂柱体积。

2.根据权利要求1所述的均一组分低聚原花青素的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，包括以下条件中任一项或多项：

a、所述微生物为米曲霉；

b、所述微生物的接种量为1％；

c、所述发酵温度为31℃，静置发酵3天。

3.根据权利要求1所述的均一组分低聚原花青素的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述提取液为体积比为50％～80％的丙酮/水、乙醇/水或甲醇/水中的一种。

4.根据权利要求3所述的均一组分低聚原花青素的制备方法，其特征在于，所述提取液为体积比为70％的丙酮/水。

5.根据权利要求1所述的均一组分低聚原花青素的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述萃取所用萃取剂为乙酸乙酯。

6.根据权利要求1所述的均一组分低聚原花青素的制备方法，其特征在于，用盐酸-香草醛法检测低聚原花青素的平均聚合度。